[发明专利]动物组织DNA提取方法无效
| 申请号： | 201010559156.5 | 申请日： | 2010-11-25 |
| 公开（公告）号： | CN102140448A | 公开（公告）日： | 2011-08-03 |
| 发明（设计）人： | 王伟;刘珊;石磊 | 申请（专利权）人： | 大连海洋大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 大连非凡专利事务所 21220 | 代理人： | 田和穗 |
| 地址： | 116000 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开一种操作简单，不但提取速度快，而且所提取的DNA纯度高的动物组织DNA提取方法，按如下步骤进行：取动物组织50mg，剪碎后置于匀浆器中，加入300μl匀浆液冰浴研磨；加入3μl 10mg/mlde蛋白酶K、15μl 10％SDS，混匀后于55℃水浴中置2～4小时至溶液呈透明粘稠状；加5M乙酸钾至终浓度1M，混匀，4℃放置30min；4℃，12000r/min离心10min；取上清液移至另一离心管中，加入二倍体积预冷的无水乙醇，4℃放置1h；4℃，12000r/min离心10min；弃上清，用预冷的70％乙醇洗涤沉淀2次后室温干燥，50μlTE溶解；向e步骤所得溶液中加入1/50体积的10mg/ml的RnaseA，37℃恒温1h。 | ||
| 搜索关键词： | 动物 组织 dna 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种动物组织DNA提取方法，其特征在于按如下步骤进行：a.取动物组织50mg，剪碎后置于匀浆器中，加入300μl匀浆液冰浴研磨，所述匀浆液为0.06M EDTA、0.1M Tris‑HCl、0.16M蔗糖、0.08M NaCl；b.加入3μl 10mg/mlde蛋白酶K、15μl10％SDS，混匀后于55℃水浴中置2～4小时至溶液呈透明粘稠状；c.加5M乙酸钾至终浓度1M，混匀，4℃放置30min；d.4℃，12000r/min离心10min；取上清液移至另一离心管中，加入二倍体积预冷的无水乙醇，4℃放置1h；e.4℃，12000r/min离心10min；弃上清，用预冷的70％乙醇洗涤沉淀2次后室温干燥，50μlTE溶解；f.向e步骤所得溶液中加入1/50体积的10mg/ml的RnaseA，37℃恒温1h。
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