[发明专利]肺炎链球菌C多糖的纯化方法有效
| 申请号： | 201010564102.8 | 申请日： | 2010-11-26 |
| 公开（公告）号： | CN102094053A | 公开（公告）日： | 2011-06-15 |
| 发明（设计）人： | 沈荣;任珍芸 | 申请（专利权）人： | 兰州生物制品研究所 |
| 主分类号： | C12P19/04 | 分类号： | C12P19/04;C12R1/46 |
| 代理公司： | 上海翰鸿律师事务所 31246 | 代理人： | 李佳铭;张文伯 |
| 地址： | 730046 *** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明涉及肺炎链球菌C多糖的纯化方法。本发明的肺炎链球菌C多糖纯化方法包括菌体裂解、乙醇分级沉淀、去除蛋白杂质等步骤。通过对C多糖纯化方法工艺参数的优化，获得的C多糖结构完整，磷含量、氨基己糖含量、糖醛酸含量等关键指标，以及抗原活性、分子量大小等均与参比C多糖接近，而且杂质含量低，收率较高，适合作为肺炎链球菌多糖疫苗、蛋白结合疫苗生产中C多糖检测的对照品，也可用于评价肺炎链球菌多糖疫苗、蛋白结合疫苗的检测试剂。 | ||
| 搜索关键词： | 肺炎 链球菌 多糖 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种肺炎链球菌C多糖的的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)培养肺炎链球菌菌体；(2)在菌液中加入终浓度为0.1～0.8％的脱氧胆酸钠(DOC)，冷库放置至裂解菌体；调节菌体裂解液pH值在3.0～5.0范围，离心收获上清液；(3)调节上一步所得的上清液pH值到6.5，加入终浓度为0.5M的CaCl2；再调pH值到7.0，加入终浓度为25～30％的乙醇，冷库放置；离心收获上清液；(4)调节上一步所得的上清液pH值到5.0，以5％为一个梯度依次加入乙醇，冷库放置，离心收获沉淀；最终乙醇浓度达到65～75％，合并各次沉淀；(5)用蒸馏水复溶上一步所得的沉淀，加入终浓度为0.5％的脱氧胆酸钠，调节pH值在3.0～5.0范围，离心收获上清液；(6)浓缩、干燥上一步所得上清液，得到精制C多糖。
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