[发明专利]与小麦白粉病抗性基因PmHNK54连锁的标记引物及其应用无效

专利信息
申请号: 201010572276.9 申请日: 2010-12-03
公开(公告)号: CN101988064A 公开(公告)日: 2011-03-23
发明(设计)人: 许为钢;李春鑫;胡琳;张磊;王会伟;董海滨;张建周 申请(专利权)人: 河南省农业科学院
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12Q1/68
代理公司: 郑州大通专利商标代理有限公司 41111 代理人: 张爱军
地址: 450002 *** 国省代码: 河南;41
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摘要: 发明涉及与小麦白粉病抗病基因PmHNK54紧密连锁的标记引物及其在分子标记辅助育种中的应用。标记引物在遗传图谱上的顺序为Xbarc5、PmHNK54、Xgwm312,Xbarc5、Xgwm312与PmHNK54的遗传距离分别为5.0cM、6.0cM。SSR标记筛选时PCR反应体系10μl,含10×buffer1μl,10mM/μldNTP0.2μL、20uM/μL引物0.2μl、5U/ulTaq酶0.1ul、去离子水8.1μl、20ng/μl基因组DNA0.4μl;扩增程序为:94℃预变性3min,94℃变性1min,55℃或60℃复性1min,72℃延伸2min,40个循环;72℃延伸10min;扩增产物用6%变性聚丙烯酰胺凝胶或8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,硝酸银染色后观察照相。本发明首次定位了小麦亲本材料郑9754中的白粉病抗性新基因PmHNK54,标记特异性强、稳定性高,适合大批次、高通量、自动化的优点,节约成本,提高选择效率。
搜索关键词: 小麦 白粉病 抗性 基因 pmhnk54 连锁 标记 引物 及其 应用
【主权项】:
与小麦白粉病抗性基因PmHNK54连锁的标记引物,其特征在于,所述标记引物的核苷酸序列为: 标记引物Xbarc5, P1:5’‑GCGCCTGGACCGGTTTTCTATTTT‑3’,P2:5’‑GCGTTGGGAATTCCTGAACATTTT ‑3’,或者标记引物Xgwm312,     P3:5’‑ATCGCATGATGCACGTAGAG ‑3’, P4:5’‑ACATGCATGCCTACCTAATGG ‑3’。
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