[发明专利]利用pRC/CMV-EGFP质粒创制转绿色荧光蛋白基因叉尾斗鱼方法无效
| 申请号： | 201010577432.0 | 申请日： | 2010-12-03 |
| 公开（公告）号： | CN102121032A | 公开（公告）日： | 2011-07-13 |
| 发明（设计）人： | 钟伯雄;高强;杨国梁;龙勇;危浩;王军毅;庄兰芳;叶少群 | 申请（专利权）人： | 浙江大学;浙江省淡水水产研究所 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/65;A01K67/027;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 林怀禹 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用pRC/CMV-EGFP创制转绿色荧光蛋白基因叉尾斗鱼方法。是先构建带有绿色荧光蛋白基因的pRC/CMV-EGFP质粒，利用显微注射技术将这种质粒导入到叉尾斗鱼受精卵内，使绿色荧光蛋白基因导入到叉尾斗鱼基因组内，并得到稳定遗传和表达，从而创制成一种转基因叉尾斗鱼，这种转基因叉尾斗鱼既能够用于基因功能研究又提升了其观赏价值。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 prc cmv egfp 质粒 创制 绿色 荧光 蛋白 基因 叉尾斗鱼 方法 | ||
【主权项】：
一种利用pRC/CMV‑EGFP质粒创制转绿色荧光蛋白基因叉尾斗鱼方法，该方法的步骤如下：(1)采用分子克隆技术和基因重组的方法，将具有CMV强启动子的PRC/CMV真核表达载体与EGFP连接构建获得带有绿色荧光标记基因的pRC/CMV‑EGFP真核表达质粒，pRC/CMV‑EGFP质粒包含Amp抗性基因、PCMV启动子、绿色荧光蛋白标志基因和SV40的多聚腺苷酸识别序列；(2)采用显微注射转基因方法，将pRC/CMV‑EGFP质粒导入叉尾斗鱼受精卵G0代，饲养至成鱼以交配续代G1代，在G1代的胚胎发育至仔鱼时期，通过选择荧光标志基因获得稳定遗传的转基因叉尾斗鱼。
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