[发明专利]一种双酶偶联法辅助提取茄尼醇的方法

摘要

本发明公开了一种双酶偶联法辅助提取茄尼醇的方法。该方法利用纤维素酶改变马铃薯叶细胞壁的通透性，然后用脂肪酶水解结合态的茄尼醇，克服了传统工艺直接提取后接着纯化或试剂提取后用碱皂化导致茄尼醇降解或异构化，从而得率较低的缺点。

主权项

一种双酶偶联法辅助提取茄尼醇的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：1)将干马铃薯叶粉碎后过40目～60目筛，加入蒸馏水，干马铃薯叶原料与蒸馏水的质量与体积比为20g∶100ml～400ml，在超声波功率150～250W、频率40KHz、温度30℃～60℃条件下超声水洗20～60min，然后过滤得固体物质A；2)向物质A中加入用pH4.0～5.6的柠檬酸缓冲液配制的浓度为0.001g/ml～0.004g/ml的纤维素酶液，干马铃薯叶原料与所述纤维素酶液的质量体积比为20g∶100ml～300ml，在温度30℃～60℃、搅拌速度100～120r/min条件下酶解1～5小时，并在3600～4000转/分钟条件下离心10～15min，然后弃除上清液得物质B；3)向物质B中加入用pH7～9的磷酸氢二钠‑磷酸二氢钾缓冲液配制的质量浓度为0.001g/ml～0.006g/ml的脂肪酶液，干马铃薯叶原料与脂肪酶液的质量体积比为20g∶100ml～500ml，在温度30℃～60℃、搅拌速度100～120r/min条件下酶解1～5小时，再在3600～4000转/分钟下离心10～15min，然后弃除上清液得物质C；4)向物质C中加入95％乙醇，干马铃薯叶原料与95％乙醇的质量体积比为20g∶300ml～600ml，在微波频率2450MHz、功率为200～400W、温度30℃～60℃、搅拌速度60～100r/min条件下微波辅助回流提取1小时，将收集的提取液在0.08MPa条件下抽滤，再将收集的滤液在0.08Mpa真空度，50℃条件下减压浓缩至粘稠状得茄尼醇粗制品D，粗制品D中，所述茄尼醇的含量为15～19％，茄尼醇的收率为87％～92％。