[发明专利]NGAL质粒构建及其融合蛋白的表达无效
申请号: | 201010590430.5 | 申请日: | 2010-12-09 |
公开(公告)号: | CN102127564A | 公开(公告)日: | 2011-07-20 |
发明(设计)人: | 王小中;熊火梅;黄波;肖芸;刘静;章海斌 | 申请(专利权)人: | 南昌大学 |
主分类号: | C12N15/79 | 分类号: | C12N15/79;C12N15/62;C07K19/00;C12P21/02 |
代理公司: | 南昌新天下专利商标代理有限公司 36115 | 代理人: | 施秀瑾 |
地址: | 330031 江西省*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | 一种NGAL质粒构建及其融合蛋白的表达,其特征是(1)PCR扩增NGAL的cDNA;(2)PCR产物与载体pET28a连接,构建重组质粒pET28a-NGAL;(3)重组质粒pET28a-NGAL转化大肠杆菌Rosetta DE3,IPTG诱导蛋白表达,得到NGAL融合蛋白。本发明通过PCR扩增、连接、转化与筛选,证实未加IPTG诱导前,没有融合蛋白的表达,IPTG诱导后3小时可获得高效表达NGAL融合蛋白,该蛋白质可用于筛选或抗NGAL蛋白质的抗体。表达的重组NGAL蛋白还可用于寻找有治疗价值的能抑制或激活NGAL功能的蛋白质分子。 | ||
搜索关键词: | ngal 质粒 构建 及其 融合 蛋白 表达 | ||
【主权项】:
一种NGAL原核表达质粒的构建,其特征:(1)PCR扩增NGAL的cDNA;(2)PCR产物与载体pET28a连接,构建重组质粒pET28a‑NGAL;(3)重组质粒pET28a‑NGAL转化大肠杆菌Rosetta DE3,IPTG诱导蛋白表达,得到NGAL融合蛋白。
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