[发明专利]一种应用硅胶柱层析分离去氢紫堇碱的方法

摘要

本发明公开了一种应用硅胶柱层析分离去氢紫堇碱的方法：（1）取200~300目的硅胶，加入氯仿搅拌后倒入层析柱中装柱；（2）将元胡的乙醇粗提物用少量氯仿、甲醇体积比为50:1混合的溶剂溶解，制成样品溶液上样，依次用氯仿、甲醇体积比为50:1、40:1、30:1的洗脱剂进行梯度洗脱，洗脱剂流速为1.6~2.5ml/min，等体积收集洗脱液，合并与去氢紫堇碱标准品Rf值及保留时间相同且去氢紫堇碱纯度大于90%的洗脱液，用旋转蒸发仪回收溶剂，得到去氢紫堇碱粗品；（3）步骤（2）得到的去氢紫堇碱粗品除色素后用甲醇或氯仿结晶，得到去氢紫堇碱纯品。本发明工艺简单，回收率高，分离得到的去氢紫堇碱纯度高。

主权项

一种应用硅胶柱层析分离去氢紫堇碱的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)取200～300目的硅胶，加入氯仿搅拌，置于超声振荡器中振荡至没有气泡后倒入层析柱中装柱，得到硅胶柱；(2)将元胡的乙醇粗提物用少量氯仿、甲醇体积比为50∶1混合的溶剂溶解，制成供试品溶液，取供试品溶液作为样品溶液上样，使样品溶液完全吸附于硅胶上，所述样品溶液中元胡的乙醇粗提物与硅胶柱中硅胶的质量比为1∶30～105，依次用氯仿、甲醇体积比为50∶1的洗脱剂洗脱150～250min、氯仿、甲醇体积比40∶1的洗脱剂洗脱150～250min，氯仿、甲醇体积比30∶1的洗脱剂洗脱至薄层层析跟踪检测至洗脱液中无去氢紫堇碱组分，洗脱剂流速为1.6～2.5ml/min，等体积收集洗脱液，将收集得到的洗脱液用薄层层析与高效液相色谱进行检测，合并与去氢紫堇碱标准品Rf值及保留时间相同且去氢紫堇碱纯度大于90％的洗脱液，用旋转蒸发仪回收溶剂，得到去氢紫堇碱粗品；(3)步骤(2)得到的去氢紫堇碱粗品除色素后用甲醇或氯仿结晶，得到去氢紫堇碱纯品。