[发明专利]一种无载体固定化脂肪酶及其制备方法无效
| 申请号： | 201010603504.4 | 申请日： | 2010-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN102154256A | 公开（公告）日： | 2011-08-17 |
| 发明（设计）人： | 杨缜;赖璟琦 | 申请（专利权）人： | 深圳大学 |
| 主分类号： | C12N11/00 | 分类号： | C12N11/00 |
| 代理公司： | 深圳市威世博知识产权代理事务所(普通合伙) 44280 | 代理人： | 何青瓦 |
| 地址： | 518060 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种无载体固定化脂肪酶的制备方法，包括以下步骤：1)酶液配制；2)以缓冲体系硫酸铵终浓度50％沉淀脂肪酶分子；3)加入交联剂戊二醛；4)离心，得到不溶于水的沉淀物颗粒；5)使用冷冻干燥使其完全干燥后得到淡黄色的粉末状物质即为无载体固定化的扩展青霉脂肪酶(PEL-CLEA)。本发明所述方法通过脂肪酶在硫酸铵沉淀的作用下，利用交联剂戊二醛把酶分子交联聚集，来实现脂肪酶固定化目的，成本低、易于操作。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 载体 固定 脂肪酶 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种无载体固定化脂肪酶的制备方法，包括以下步骤：1)将脂肪酶冻干酶粉溶解于磷酸缓冲液中制成酶液；2)步骤1)中的酶液在搅拌的同时加入硫酸铵固体，硫酸铵饱和度达到50％，搅拌，使脂肪酶沉淀；3)步骤2)完成后，逐滴加入浓度为12.5％(v/v)的戊二醛溶液并于4℃搅拌；4)将步骤3)得到的悬浊液离心，得到不溶于水的颗粒，用磷酸缓冲液清洗，至上清中不含有脂肪酶水解活性为止；5)将步骤4)中得到的不溶于水的颗粒冷冻干燥，得到淡黄色的粉末，即为无载体固定化脂肪酶。
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