[发明专利]一种肝素钠的提取方法

摘要

本发明公开了一种肝素钠的提取方法，该方法采用健康猪的小肠粘膜为主要原料，经过酶解、灭酶、过滤、酶解蛋白、除蛋白、沉淀、精制、干燥后即获肝素钠。本发明方法生产周期短、成本低、收率高，不产生任何有毒有害物质，而且所得产品安全性高，可用于药品领域。

主权项

一种肝素钠的提取方法，其步骤如下：A、酶解：称取健康猪的小肠粘膜作为原料，投入反应釜，加入原料重量的0.5%的酶活力为3.5万U／g的牛胰脂肪酶，混匀后调至pH8.0‑9.0，升温至45‑50℃，恒温搅拌酶解2.8h，酶解过程中控制反应体系的pH值稳定；B、灭酶：将所得酶解液升温至90℃，维持10min灭酶，然后立即冷却；C、过滤：冷却液用过滤机过滤两次，先用孔径为2μm的滤膜粗滤，再用孔径为0.22μm的滤膜过滤，以除去杂质，得过滤液；D、酶解蛋白质：将过滤液调至pH7.5‑9.0，然后升温至45‑55℃，加入原料重量的0.5%的酶活力为3.8万U/g风味蛋白酶，在45‑55℃搅拌酶解4‑6h，酶解过程中控制反应体系的pH值稳定，然后将酶解液升温至90℃，维持10min以灭酶，然后立即冷却，得冷却液；E、除蛋白：将冷却液用滤膜孔径为5nm的过滤机过滤以除去蛋白质并浓缩，得浓缩液；F、沉淀：向浓缩液中加入与其等体积的95wt%乙醇，搅拌均匀后沉淀10h，然后除去上清液，收集沉淀，沉淀中加入与其等体积的无水乙醇脱水，脱水后冷冻干燥得肝素钠粗品；G、精制：加入9倍粗品重量的纯水将粗品溶解，然后调pH至1.5，过滤除杂，所得滤液再调pH至11，记下此时溶液的体积，再按此体积的4%加入30wt%过氧化氢，25℃下放置氧化，注意控制反应体系的pH稳定在11，氧化30h后，调pH至6.5，然后加入与此时的溶液等体积的95wt%乙醇，搅拌均匀后静置沉淀10h，然后除去上清液，向沉淀中加入与其等体积的无水乙醇进行脱水, 然后过滤掉乙醇得沉淀，沉淀经晾晒蒸发去残留乙醇，再真空干燥得肝素钠精品。