[发明专利]新型双作用靶点重组水蛭素突变体的优化设计与应用无效
| 申请号： | 201010618036.8 | 申请日： | 2010-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN102153646A | 公开（公告）日： | 2011-08-17 |
| 发明（设计）人： | 谭树华;王航;许静 | 申请（专利权）人： | 中国药科大学 |
| 主分类号： | C07K14/815 | 分类号： | C07K14/815;C12N15/09;C12N15/63 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 211198 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种新型双作用靶点重组水蛭素III突变体R33G34D35M36-rHV3及其制备方法。前期结果(Tan，S.et al.(2007).Mol Biotechnol 36(1)，1-8)显示，R33G34D35-rHV3不表现抗血小板聚集活性，而R33G34D35S36-rHV3则表现出抗血小板活性。这说明紧随RGD之后的第36位氨基酸残基种类对抗血小板聚集活性高低至关重要。本发明通过对紧随RGD序列之后的第36位进行点饱和突变，获得了R33G34D35X36-rHV3突变体库，并对突变体进行了分泌表达和产物分离纯化，在此基础上比较了R33G34D35X36-rHVIII各种突变体的抗凝血酶活性比活力和抗ADP诱导的血小板聚集抑制率，并从中筛选出了与rHV3抗凝血酶活性比活力相当，而抗ADP诱导的血小板聚集抑制率很高的双作用靶点水蛭素新突变体R33G34D35M36-rHV3。 | ||
| 搜索关键词： | 新型 作用 重组 水蛭 突变体 优化 设计 应用 | ||
【主权项】：
一种具有与重组野生型水蛭素III(rHVIII)抗凝血酶活性比活力相当，而同时具有很高的抗ADP诱导的血小板聚集抑制率的双作用靶点水蛭素新突变体R33G34D35M36‑rHVIII，其特征在于在rHVIII的第33‑36位引入了可与活化血小板上的最丰富的GPIIb/IIIa受体结合从而抑制血小板聚集的吸附序列为RGDM。
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