[发明专利]与RNA对应的双链DNA的合成方法以及扩增方法无效
| 申请号： | 201080020926.7 | 申请日： | 2010-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN102428180A | 公开（公告）日： | 2012-04-25 |
| 发明（设计）人： | 林田幸信 | 申请（专利权）人： | 和光纯药工业株式会社 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09 |
| 代理公司： | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 11006 | 代理人： | 徐金国 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 日本;JP |
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| 摘要： | 本发明提供一种价格低廉、操作简便，由特定RNA合成对应的双链DNA的方法以及扩增该双链DNA的方法。含有与具有polyA的模板RNA相对应的碱基序列的双链DNA的合成方法，其特征在于，工序1为使用5’末端添加已知序列的DNA片段的寡聚(dT)引物，对具有polyA的模板RNA进行逆转录反应，得到单链DNA；工序2为在不具有3’→5’核酸外切酶活性和链置换活性的聚合酶的存在下，使用5’末端添加已知序列的DNA片段的随机引物，将工序1中得到的单链DNA进行双链化反应，得到双链DNA。本发明还提供含有与具有polyA的模板RNA相对应的碱基序列的双链DNA的扩增方法，其特征在于，工序3为将得到的双链DNA进一步进行PCR反应。 | ||
| 搜索关键词： | rna 对应 dna 合成 方法 以及 扩增 | ||
【主权项】：
一种含有与具有polyA模板RNA相对应的碱基序列的双链DNA的合成方法，其特征在于包括，1)使用5’末端添加已知序列的DNA片段的寡聚(dT)引物，对具有polyA的模板RNA进行逆转录反应，得到单链DNA的工序1，和2)在不具有3’→5’核酸外切酶活性和链置换活性的聚合酶的存在下，使用5’末端添加已知序列的DNA片段的随机引物，将工序1中得到的单链DNA进行双链化反应，得到双链DNA的工序2。
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