[发明专利]使用热稳定的RNA依赖的RNA聚合酶进行指数式扩增RNA的方法无效
| 申请号： | 201080046921.1 | 申请日： | 2010-10-21 |
| 公开（公告）号： | CN102597265A | 公开（公告）日： | 2012-07-18 |
| 发明（设计）人： | 雅克·罗哈耶姆 | 申请（专利权）人： | 里博克斯艾克斯有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人： | 邓琪 |
| 地址： | 德国拉德博*** | 国省代码： | 德国;DE |
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| 摘要： | 本发明涉及一种在体外使用沙波病毒或诺瓦克病毒的热稳定的RNA依赖的RNA聚合酶进行指数式扩增RNA的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 使用 稳定 rna 依赖 聚合 进行 指数 扩增 方法 | ||
【主权项】：
一种在体外指数式扩增RNA的方法，包括：(a)温育单链RNA和沙波病毒或诺瓦克病毒的RNA依赖的RNA聚合酶，可选地，存在RNA合成的引发寡核苷酸，其反应条件使得RNA依赖的RNA聚合酶聚合形成与单链RNA互补的单链，可选地，通过延伸与所述单链RNA杂交的所述RNA合成的引发寡核苷酸以形成双链RNA；(b)在最高85℃的温度下温育步骤(b)中获得的反应混合物，使得双链RNA的双链被分开为单链RNA；(c)重复步骤(a)和(b)n次；(d)执行最终的温育步骤(a)以形成最终的双链RNA；以及可选地，(e)回收最终的双链RNA；其中，n至少为3；单链RNA的序列和/或长度选择为使得步骤(b)形成的双链RNA在最高85℃的温度下被分开为单链RNA。
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