[发明专利]一种观察花粉管萌发和生长的动态发育过程的方法

摘要

一种观察花粉管萌发和生长的动态发育过程的方法，本发明选用中性红作为染色剂对植物花粉进行染色，通过采集花粉、配制培养基、中性红梯度染色液的配置、花粉培养小室的制备、花粉的撒布、花粉培养条件的控制及显微镜观察花粉管萌发和花粉管生长的动态发育过程。染色后花粉管的萌发率和花粉管生长与不染色对照组基本一致，花粉仍然具有群体效应。本发明具有快速、简便、稳定及观察效果好等特点，并可直接观察到花粉管的萌发和花粉管生长的动态发育过程。

主权项

一种观察花粉管萌发和生长的动态发育过程的方法，具体步骤如下：1)、花粉的采集采集当天开放的花粉；2)、花粉培养基的制备取蔗糖5％‑20％，琼脂0.3％‑0.6％，硼酸0.04％，其余加入水，配成溶液PH值＝5.4‑6.4；3)、中性红染色液的配制用30％的酒精配制浓度范围为0.01％‑0.15％的中性红染色液；4)、花粉培养室的制备选用培养皿作为花粉培养室，培养皿底盛2ml水，培养皿盖涂薄层培养基；5)、薄层培养基的制备培养基趁热取出，用移液枪吸取培养液，在培养皿盖内侧滴加1ml的培养基溶液，然后立刻用玻璃接种环将培养基溶液展开成薄层的培养基；6)、花粉的撒布将带有培养基的培养皿水平放置于实验台上，用镊子摘除花絮的花瓣，夹住花药下方花丝，取出花药，将花药轻轻在培养基表面上滑动，或将夹有花药的镊子轻轻的在培养皿边缘敲几下使花粉单层、均匀地散落分布在培养基表面上；7)、中性红染色液染色用移液枪在培养基上有花粉处滴加0.5ml中性红染色液，将花粉染色30秒，将培养皿竖起，用吸水纸在培养基边缘将染液充分吸干；8)、花粉培养将培养物置于恒温箱内，温度控制在22℃‑25℃，20分钟后开始观察花粉管萌发和花粉管生长的动态发育过程。