[发明专利]多肽合成卡贝缩宫素的制备方法

摘要

本发明公开了一种多肽合成卡贝缩宫素的制备方法，本发明的技术方案包括以下步骤：采用RinkAmideMBHA树脂为起始原料，以Fmoc保护的氨基酸为单体，依次连接氨基酸，其中Cys采用Fmoc-Cys(CH2CH2CH2COOR)-OH，最后一个氨基酸使用Fmoc-Tyr(Me)-OH，得到保护的九肽树脂后，脱掉Tyr的Fmoc氨基保护基，用TFA等切肽试剂将直链肽从树脂上切落，加乙醚沉淀直链肽粗品，再加入BOP/HOBt/DMF进行成环反应，采用制备型HPLC进行分离纯化，获得目标产物。本发明的方法，每步接肽收率均在99%以上，切肽后收率为96.2%，总收率高达35%以上。本发明的方法便于工业化实施，具有较大的产业化前景。

主权项

本发明是一种多肽合成卡贝缩宫素的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）以Rink Amide MBHA树脂为起始原料，以Fmoc保护的氨基酸为单体，依次连接氨基酸，其中Cys采用Fmoc‑Cys(CH2CH2CH2COOR)‑OH，此处R可以是‑Trt基、‑tBu基、‑Acm基或‑Bzl基；最后一个氨基酸使用Fmoc‑Tyr(Me)‑OH；所述Rink Amide MBHA树脂为一种常用的氨基树脂，可采用市售产品，如天津南开和成科技有限公司的产品；（2）以TFA/HCl/TIS/HAc为切肽试剂，将多肽从树脂上切落；（3）以乙醚为溶剂，沉淀并收集直链肽粗品；（4）用BOP/HOBt/DMF进行成环反应；（5）将粗品溶于水，通过制备型HPLC进行分离纯化，填料为C18，流动相采用硫酸铵水溶液和乙腈的混合溶液；检测波长为280nm。