[发明专利]应用GCA稳定转染细胞系测定BNP活性有效
申请号: | 201110004553.0 | 申请日: | 2011-01-11 |
公开(公告)号: | CN102174636A | 公开(公告)日: | 2011-09-07 |
发明(设计)人: | 王军志;饶春明;于雷;高凯;史新昌 | 申请(专利权)人: | 中国食品药品检定研究院 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02;C12N5/10 |
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地址: | 100050*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明“应用GCA稳定转染细胞系测定BNP活性”,建立了一种新的脑利钠肽(BNP)生物活性测定方法。GCA是BNP的主要受体,它是一种腺苷酸环化酶前体,被BNP激活后,催化GTP产生cGMP,继而发挥生物学效应。野生293细胞GCA表达水平低,对于BNP反应性弱,本方法是转基因构建BNP受体(GCA)超表达的稳定细胞株293GCAC3,通过检测BNP刺激后293GCAC3分泌到细胞上清中的cGMP的含量变化,来对BNP活性进行定量。具体检测步骤为:细胞铺96孔板,培养16-18小时,加入BNP刺激90分钟,吸取细胞上清用竞争ELISA检测cGMP含量。该方法操作简单,反应灵敏,变异性小,对于BNP的质量控制和临床应用具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 应用 gca 稳定 转染 细胞系 测定 bnp 活性 | ||
【主权项】:
一种应用转基因细胞株来检测脑利钠肽(BNP)生物活性的方法,其特征在于:根据BNP及其受体的作用机制,构建BNP反应性转基因细胞株。
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