[发明专利]应用GCA稳定转染细胞系测定BNP活性有效

专利信息
申请号: 201110004553.0 申请日: 2011-01-11
公开(公告)号: CN102174636A 公开(公告)日: 2011-09-07
发明(设计)人: 王军志;饶春明;于雷;高凯;史新昌 申请(专利权)人: 中国食品药品检定研究院
主分类号: C12Q1/02 分类号: C12Q1/02;C12N5/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 100050*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明“应用GCA稳定转染细胞系测定BNP活性”,建立了一种新的脑利钠肽(BNP)生物活性测定方法。GCA是BNP的主要受体,它是一种腺苷酸环化酶前体,被BNP激活后,催化GTP产生cGMP,继而发挥生物学效应。野生293细胞GCA表达水平低,对于BNP反应性弱,本方法是转基因构建BNP受体(GCA)超表达的稳定细胞株293GCAC3,通过检测BNP刺激后293GCAC3分泌到细胞上清中的cGMP的含量变化,来对BNP活性进行定量。具体检测步骤为:细胞铺96孔板,培养16-18小时,加入BNP刺激90分钟,吸取细胞上清用竞争ELISA检测cGMP含量。该方法操作简单,反应灵敏,变异性小,对于BNP的质量控制和临床应用具有重要意义。
搜索关键词: 应用 gca 稳定 转染 细胞系 测定 bnp 活性
【主权项】:
一种应用转基因细胞株来检测脑利钠肽(BNP)生物活性的方法,其特征在于:根据BNP及其受体的作用机制,构建BNP反应性转基因细胞株。
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