[发明专利]一种从组织中分离富集靶细胞的方法无效
申请号: | 201110005376.8 | 申请日: | 2011-01-12 |
公开(公告)号: | CN102174465A | 公开(公告)日: | 2011-09-07 |
发明(设计)人: | 邓亚光;邓存常;邓伟平 | 申请(专利权)人: | 武汉格蓝丽富科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/07 | 分类号: | C12N5/07;C12N5/09 |
代理公司: | 北京市德权律师事务所 11302 | 代理人: | 周发军 |
地址: | 430075 湖北省*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种从组织中分离富集靶细胞的方法,属于生物科学和药物研发领域。该方法将组织制备成单细胞的悬浮液,利用阳性富集法将靶细胞从该细胞悬浮液中分离富集出来。本方法可以从不同处理状态下的组织中分离富集出靶细胞,为基础研究,临床研究,诊断,以及药物研发等提供足够量的,高度纯化的实验材料。 | ||
搜索关键词: | 一种 组织 分离 富集 靶细胞 方法 | ||
【主权项】:
一种从组织中分离富集靶细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将组织块在缓冲液中制备成单细胞的悬浮液;(2)对单细胞的悬浮液进行离心处理,除去上清液,加入胰蛋白酶处理;接着加入含有10%动物血清的细胞培养基,离心处理,除去上清液;最后加入含有10%动物血清的细胞培养基,转移到试管内;(3)向试管内加入磁珠,磁珠与悬浮液中的靶细胞相结合,在4℃或室温下培养30~60分钟;所述磁珠含有单一的靶细胞的表面抗体、细胞质内抗体或者两者都有,磁珠粒径为50nM~4.5uM,磁珠的浓度为单细胞悬浮液浓度的十分之一到五百分之一;(4)利用磁场器械将靶细胞从细胞悬浮液中分离富集出来;(5)加入缓冲液,清洗掉非特异性结合的非靶细胞;(6)抽离磁场,让与磁珠结合的靶细胞从磁场中释放出来,从而得到靶细胞。
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