[发明专利]金丝桃素提纯方法

摘要

一种金丝桃素提纯方法，包括：将贯叶金丝桃浸膏粉碎，与乙醇溶液溶解后超声提取，加明胶溶液除鞣得贯叶金丝桃浸膏除鞣液；将PEK微球与蒸馏水混悬，转入层析柱，取贯叶金丝桃浸膏除鞣液湿法上样，用水-乙醇溶液体系梯度洗脱，浓缩洗脱液得金丝桃素粗品；将PDCX微球与丙酮溶液混悬，转入层析柱，取金丝桃素粗品以丙酮溶液充分溶解后湿法上样，用丙酮溶液梯度洗脱，处理洗脱液得金丝桃素精品；将反相硅胶填料与色谱纯甲醇混悬，转入层析柱，取金丝桃素精品以甲醇充分溶解后上样，以甲醇-磷酸氢二钠缓冲液洗脱，HPLC检测洗脱液后合并相同成分，得金丝桃素提纯物。本发明利用PEK微球、PDCX微球等纳米微球材料分离纯化金丝桃素，产品金丝桃素含量在90%以上。

主权项

一种金丝桃素提纯方法，其特征在于，包括如下步骤：准备步骤：将贯叶金丝桃浸膏粉碎，并加入乙醇溶液溶解后进行超声提取获得提取液，然后在提取液中加入明胶溶液除鞣，制得贯叶金丝桃浸膏除鞣液；PEK微球层析步骤：将PEK微球与蒸馏水混悬，转入层析柱，待PEK微球沉降完全后，以蒸馏水平衡柱床，取适量贯叶金丝桃浸膏除鞣液湿法上样于PEK微球层析柱顶部，再用水‑乙醇溶液体系进行梯度洗脱，并收集最后一次洗脱的洗脱液，浓缩制得金丝桃素粗品；PDCX微球层析步骤：将PDCX微球与丙酮溶液混悬，转入层析柱，待PDCX微球沉降完全后，以丙酮溶液平衡柱床，取以上制得的金丝桃素粗品以丙酮溶液充分溶解后取适量湿法上样于PDCX微球柱顶部，再用丙酮溶液进行梯度洗脱，并收集最后一次洗脱的洗脱液，浓缩并调整PH值至2～3，低温下静置12±0.5h后离心分取沉淀，上清液再置于低温下静置12±0.5h，随后再离心得沉淀，合并沉淀得金丝桃素精品；ODS层析步骤：将反相硅胶填料与色谱纯甲醇混悬，转入层析柱，待反相硅胶微球沉降完全后，以甲醇‑磷酸氢二钠缓冲液平衡柱床，取以上制得的金丝桃素精品以甲醇充分溶解后取适量上样于层析柱顶部，以甲醇‑磷酸氢二钠缓冲液洗脱，分步收集洗脱液，HPLC检测后合并相同的成分，获得金丝桃素提纯物。