[发明专利]一种细胞DNA损伤检测试剂盒及其检测方法无效
申请号: | 201110026864.7 | 申请日: | 2011-01-25 |
公开(公告)号: | CN102146455A | 公开(公告)日: | 2011-08-10 |
发明(设计)人: | 宋刚;陈以旺;王伟伟;胡天惠 | 申请(专利权)人: | 厦门大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 厦门南强之路专利事务所 35200 | 代理人: | 马应森 |
地址: | 361005 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 一种细胞DNA损伤检测试剂盒及其检测方法。涉及细胞DNA损伤检测技术,提供一种细胞DNA损伤检测试剂盒及其检测方法。包括:低熔点琼脂糖、细胞裂解液、细胞解旋液和DNA染色剂。检测方法为:将细胞DNA损伤样品悬液与低熔点琼脂糖凝胶混匀,混合液点样到凝胶板样品孔中;凝胶板浸入细胞裂解液中避光裂解;裂解后的凝胶板浸入细胞解旋液中解旋,解旋完毕后电泳;电泳后滴加DNA染色剂染色,在荧光显微镜下分析检测结果。用96孔细胞培养板的板盖作为凝胶板代替载玻片用于单细胞凝胶电泳,与传统的单细胞凝胶电泳的样品玻片要铺2、3层胶的工艺相比,将铺胶点样步骤合二为一,使得样品制备工艺简单,容易操作,不脱胶,成功率高。 | ||
搜索关键词: | 一种 细胞 dna 损伤 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】:
一种细胞DNA损伤检测试剂盒,其特征在于设有盒体和试剂,所述试剂包括低熔点琼脂糖、细胞裂解液、细胞解旋液和DNA染色剂;所述细胞裂解液由溶液A和溶液B组成,所述溶液A的配方为:2~3mol/LNaCl,0.1~0.2mol/L EDTA‑Na2,5~100mmol/L Tris,质量分数0.5%~1.5%肌氨酸钠,余为去离子水;所述溶液B的配方为体积分数为1%~2%Triton‑100,5%~15%二甲基亚砜,余为去离子水,所述溶液A与溶液B按体积比1∶1混合;所述细胞解旋液的配方为:0.2~0.5mol/L NaOH,1~2mmol/L EDTA‑Na2,余为去离子水;所述DNA染色剂为碘化丙啶、溴化乙锭、Hoechst 33342、hoechst 33358或DAPI。
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