[发明专利]一种联产丁醇、异丙醇及乙醇的重组菌及其应用

摘要

本发明公开了一种联产丁醇、异丙醇及乙醇的重组菌及其应用。本发明提供的重组菌，为按照如下8种方法制备的8类重组菌：1)将次级醇脱氢酶编码基因、辅酶A转移酶编码基因和乙酰乙酸脱羧酶编码基因导入出发菌B中，得到重组菌8；2)将次级醇脱氢酶编码基因导入出发菌A中，得到重组菌1；3)将次级醇脱氢酶编码基因导入出发菌B中，得到重组菌2。本发明的实验证明，本发明构建表达质粒psADH、psADH-ctfAB、psADH-ADC或psADH-ctfAB-ADC，同时优选电击转化的方法，使这三个基因能分别或同时在产丙酮丁醇的梭菌中高效表达。

主权项

重组菌，为按照如下8种方法制备的8类重组菌中的任一种：1)将次级醇脱氢酶编码基因、辅酶A转移酶编码基因和乙酰乙酸脱羧酶编码基因导入出发菌B中，得到重组菌8；2)将次级醇脱氢酶编码基因导入出发菌A中，得到重组菌1；3)将次级醇脱氢酶编码基因导入出发菌B中，得到重组菌2；4)将次级醇脱氢酶编码基因和辅酶A转移酶编码基因导入出发菌A中，得到重组菌3；5)将次级醇脱氢酶编码基因和辅酶A转移酶编码基因导入出发菌B中，得到重组菌4；6)将次级醇脱氢酶编码基因和乙酰乙酸脱羧酶编码基因导入出发菌A中，得到重组菌5；7)将次级醇脱氢酶编码基因和乙酰乙酸脱羧酶编码基因导入出发菌B中，得到重组菌6；8)将次级醇脱氢酶编码基因、辅酶A转移酶编码基因和乙酰乙酸脱羧酶编码基因导入出发菌A中，得到重组菌7；所述出发菌A为产丙酮丁醇的梭菌(Clostridium)；所述出发菌B为buk基因敲除的产丙酮丁醇的梭菌(Clostridium)。