[发明专利]一种玉米成熟胚原位转基因的方法

摘要

本发明涉及一种玉米成熟胚原位转基因的方法。将获得玉米成熟胚原位转基因所需的成熟胚胚芽，处理胚芽使其露出生长点并使其稍微损伤，用浸染液在玉米生长点处进行原位转基因，对浸染过的生长点处细胞与根癌农杆菌共培养，使Bar基因通过根癌农杆菌的T-DNA整合在玉米染色体上并复壮；再除草剂筛选初步获得原位转基因抗除草剂植株并移栽；通过原位转基因玉米PCR阳性植株的自交授粉获转基因玉米种子。本发明的方法对玉米成熟胚胚芽的生长点进行转基因，通过向玉米叶片喷洒或涂抹除草剂的方法进行筛选转基因植株和分子检测进一步验证PCR阳性植株，方法简单高效，转化率可达4％，对玉米基因工程和遗传育种具有重大意义。

主权项

一种玉米成熟胚原位转基因的方法，其特征在包括如下步骤：获得玉米成熟胚原位转基因所需胚芽，在玉米成熟胚原位转基因前两天用能够提供玉米生长发育的营养液浇灌基质一次，将其浇透；用浸染液在玉米成熟胚胚芽生长点处进行原位转基因，然后将涂抹过根癌农杆菌浸染液的玉米成熟胚胚芽生长点处细胞与根癌农杆菌共培养；将经过共培养的用原位转基因方法处理的玉米材料复壮；将复壮后玉米成熟胚原位转基因植株进行筛选；移栽原位转基因玉米植株；对原位转基因玉米植株做分子检测从而获得PCR阳性植株；通过原位转基因玉米PCR阳性植株的自交授粉获得转基因玉米种子。