[发明专利]提高蛋白质结晶率的方法有效
申请号: | 201110052966.6 | 申请日: | 2011-03-07 |
公开(公告)号: | CN102190702A | 公开(公告)日: | 2011-09-21 |
发明(设计)人: | 尹大川;鹿芹芹;卢慧甍;刘永明;郭卫红;商澎 | 申请(专利权)人: | 西北工业大学 |
主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14;C07K14/435;C12N9/36;C12N9/50;C12N9/22;C12N9/56 |
代理公司: | 西北工业大学专利中心 61204 | 代理人: | 黄毅新 |
地址: | 710072 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种提高蛋白质结晶率的方法,用于解决现有的生物大分子结晶条件筛选方法结晶成功率低的技术问题。技术方案包括:将蛋白质加入到缓冲溶液中,溶解,制成蛋白质溶液;将蛋白质溶液与不同的蛋白质结晶试剂混合,制得蛋白质结晶溶液;将干燥剂分多次加入到密闭容器中,且使干燥剂与蛋白质结晶溶液相互分离,与蛋白质结晶溶液进行多次结晶处理,统计出获得蛋白质大分子晶体数,计算筛选成功率。本发明使用逐级干燥的方法,干燥剂用量逐渐增加,先使一些过饱和度较高的溶液生长出晶体,随着干燥剂量的增加,一些过饱和度低的溶液也有机会长出晶体,最大限度地提高了蛋白质结晶条件的筛选成功率,而且经过多次结晶后得到的晶体的分辨率提高,结晶蛋白质的晶体质量提高。 | ||
搜索关键词: | 提高 蛋白质 结晶 方法 | ||
【主权项】:
一种提高蛋白质结晶率的方法,包括:1)制备蛋白质溶液:将蛋白质加入到缓冲溶液中,溶解,制成蛋白质溶液;2)制备蛋白质结晶溶液:将蛋白质结晶试剂与蛋白质溶液混合,制得蛋白质结晶溶液;3)蛋白质结晶:将干燥剂和蛋白质结晶溶液置于同一密闭容器中,恒温静置进行结晶;其中,干燥剂和蛋白质结晶溶液不直接接触;其特征在于:步骤3)中将干燥剂分批次加入到容器中,在密闭条件下重复进行结晶过程,直至蛋白质结晶溶液完全干燥为至。
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