[发明专利]一种高专一性的测定小RNA的方法有效
| 申请号： | 201110054104.7 | 申请日： | 2011-03-08 |
| 公开（公告）号： | CN102676637A | 公开（公告）日： | 2012-09-19 |
| 发明（设计）人： | 谭若颖;吴鸿菲;龚祖埙;丁航海 | 申请（专利权）人： | 生元科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 上海天翔知识产权代理有限公司 31224 | 代理人： | 刘粉宝 |
| 地址： | 中国香港德辅道中*** | 国省代码： | 中国香港;81 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种高专一性测定小RNA的方法。具体地，本发明方法包括步骤：(a)在小RNA的3’端添加polyA尾；(b)加入与所述的小RNA的polyA尾部互补或基本互补的引物，进行退火；(c)对小RNA进行反转录，形成cDNA；(d)在含有EvaGreen荧光染料的PCR反应体系中，对所述cDNA进行PCR扩增，从而形成双链DNA-EvaGreen荧光染料复合物，以及通过检测扩增产物来确定待检测的小RNA的存在与否和/或数量。和现有的定量检测小RNA的方法相比，本发明方法可显著提高检测小RNA(包括非编码RNA)的专一性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 专一性 测定 rna 方法 | ||
【主权项】：
一种检测小RNA的方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：(a)对于待检测的小RNA样品，在小RNA的3’端添加polyA尾；(b)加入与所述的小RNA的polyA尾部互补或基本互补的引物，从而使所述引物与添加了polyA尾的小RNA进行退火；(c)反转录所述的添加了polyA尾的小RNA，形成cDNA；(d)使用与所述cDNA互补的正向引物和反向引物，在含有EvaGreen荧光染料的PCR反应体系中，对所述cDNA进行PCR扩增，从而形成双链DNA‑EvaGreen荧光染料复合物，并且在扩增过程之中或扩增过程之后，检测扩增产物的有无和/或数量，从而确定待检测的小RNA的存在与否和/或数量。
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