[发明专利]一种大批量提取蚯蚓基因组DNA的方法

摘要

一种大批量提取蚯蚓基因组DNA的方法。本发明涉及土壤污染分子诊断中蚯蚓基因组DNA的提取技术，蚯蚓是分子生态毒理学研究和土壤污染分子诊断中常用的模式生物。该方法在蛋白酶K法的基础上进行了改进，蚯蚓头部3mm处的体节作为提取的起始样本，采用与离心管内壁相匹配的玻璃研磨杵在离心管内直接对样本进行研磨破碎；在进行酚仿抽提之前，增加一步离心操作，大大提高了蚯蚓组织消化的效率，并有效避免蚯蚓肠胃内的泥沙对核酸提取的干扰，使整个提取过程在5小时之内完成。本方法提高了蚯蚓基因组提取的成功率和效率，并具有省时省力的优点，本方法得到的高质量基因组DNA适合酶切和PCR等下游实验。

主权项

一种大批量提取蚯蚓基因组DNA的方法，其特征在于该方法的3个具体步骤，包括：第1、夹取蚯蚓头部3 mm处的体节，作为基因组DNA提取的起始样本，置于1.5 mL离心管中；第2、采用与离心管内壁相匹配的玻璃研磨杵，在离心管内直接对第1步夹取的样本进行研磨破碎；第3、采用改进的蛋白酶K法对第2步研磨破碎后的样本进行基因组DNA的提取，获得所要提取的蚯蚓基因组DNA；所述的改进的蛋白酶K法，就是在进行酚仿抽提之前，增加一步离心操作，使得残留的固体杂质沉淀在离心管底部，从而避免固体杂质对后续操作的影响，提高基因组DNA的质量和纯度。