[发明专利]检测Glypican-3的时间分辨免疫荧光试剂盒

摘要

检测Glypican-3的时间分辨免疫荧光试剂盒。试剂盒包括：包被缓冲液；封闭液；洗涤液；加样缓冲液；荧光增强液；检测缓冲液；包被抗体（羊抗人Glypican-3多抗）；检测抗体（生物素化的羊抗人Glypican-3多抗）；Eu3＋标记的链亲和霉素；标准品（重组人Glypican-3蛋白）。其使用包括：该试剂盒采用双抗体夹心法和时间分辨免疫荧光原理来检测样品中的Glypican-3蛋白的浓度。在酶标板中包被抗体包被，封闭后加入待测样品孵育，洗板，加入检测抗体孵育，再次洗板后加入Eu3＋标记的链亲和霉素孵育，然后洗板加入荧光增强液，振荡5分钟后用337nm波长光激发，延时200微秒在615nm波长处检测发射荧光值；通过标准品的浓度和相应的荧光值绘制标准曲线，待检样品中的Glypican-3浓度就可以通过它的荧光值并对应标准曲线得到。

主权项

检测Glypican‑3的时间分辨免疫荧光试剂盒，其特征在于包括以下组成：（1）包被缓冲液为磷酸盐缓冲液（PBS），其成分为140mM NaCl，2.7mM KCl， 10mM Na2HPO4，1.8mM KH2PO4，pH值为7.4；（2）封闭液为含1%BSA的PBS，其成分为PBS，1%BSA；（3）洗涤液为含0.05%Tween‑20的Tris‑HCl 缓冲液（TBS），其成分为50mM的Tris‑HCl 缓冲液（pH 7.8），0.05%Tween‑20；（4）加样缓冲液的成分为含1%BSA的PBS，其成分为PBS，1%BSA；（5）荧光增强液（Enhancement Solution）；（6）检测缓冲液（Assay Buffer）为50mM的Tris‑HCl 缓冲液（pH 7.8），其中含有1%BSA，1%bovine globulin，0.05%Tween 40，DTPA； （7）包被抗体为羊抗人Glypican‑3多抗（Sheep Anti‑Human Glypican‑3 polyantibody），储存浓度为1μg/μl；（8）检测抗体为生物素化的羊抗人Glypican‑3多抗（Biotinylated Sheep Anti‑Human Glypican‑3 polyantibody），储存浓度为50ng/μl；（9）Eu3＋标记的链亲和霉素（Eu3＋‑labeled streptavidin），储存浓度为0.1μg/μl；（10）标准品，重组人Glypican‑3蛋白（Recombinant Human Glypican‑3），浓度为100μg/μl。