[发明专利]利用苹果酸钠提高次黄嘌呤核苷产率的方法

摘要

本发明公开了一种利用苹果酸钠提高次黄嘌呤核苷产率的方法，它由摇瓶液体菌种培养、肌苷发酵液制取两大工艺过程组成。选用了遗传稳定的保藏菌种GDIR-1005，根据调整细胞代谢流分配的原理，在发酵过程中采用添加苹果酸钠和流加葡萄糖液、苹果酸钠的新工艺，有效提高肌苷发酵过程产率，克服了发酵培养基C∶N比例失调、菌种产苷不高、发酵周期长、转化率低等不足。菌种同步生产率和产苷水平高，发酵产苷水平高，肌苷产率可达58g/L以上，转化率43％以上，达到现有工艺的最高水平。

主权项

利用苹果酸钠提高次黄嘌呤核苷产率的方法，其特征是在于如下所述：(1)摇瓶液体菌种培养①选用枯草芽孢菌Bacillus subtilis GDIR‑1005为保藏菌种，②将葡萄糖、磷酸氢二钾、硫酸镁、苹果酸钠、酵母粉、琼脂、水按重量百分比配制成初级菌种培养基并装入茄瓶，③在初级菌种培养基中接入步骤(1)①所述的保藏菌种，静置培养后获得初级菌种，④将上述初级菌种接入摇瓶培养基中，并在往复式摇床上培养，获得摇瓶液体菌种；(2)高产率次黄嘌呤核苷发酵液制取①将葡萄糖、磷酸氢二钾、硫酸镁、苹果酸钠、酵母粉、水按重量百分比配制成二级菌种培养基，蒸汽灭菌后泵入二级种子罐，降温后再接入步骤(1)④所述的摇瓶液体菌种，并将经压缩、过滤的无菌空气输入二级种子罐，培养后获得二级菌种；②将葡萄糖、磷酸氢二钾、硫酸镁、苹果酸钠、酵母粉、水按重量百分比配制成发酵培养基，蒸汽灭菌后泵入发酵罐，降温后再接入步骤(2)①所述的二级菌种，并将经蒸汽灭菌、降温后的葡萄糖与苹果酸钠液，在无菌、空气保压的情况下进行连续流加培养，即可获得高产率次黄嘌呤核苷发酵液。