[发明专利]一种将微小核糖核酸簇用于改变细胞命运的方法

摘要

本发明的目的是提供一种微小核糖核酸(miRNA)或微小核糖核酸簇(miRNA簇)促进细胞形成诱导性多能干细胞而改变细胞命运的方法。方法包括如下步骤：步骤1、从供体基因组中克隆miRNA或miRNA簇的基因并获取供体细胞；步骤2、利用步骤1中的miRNA或miRNA簇将步骤1中供体细胞的细胞命运改变；步骤3、对步骤2中得到的细胞进行鉴定。与现有技术相比，miRNA或miRNA簇的利用，可以不使用癌基因c-myc来诱导干细胞，降低了潜在的致癌性，可以加速细胞命运的改变，同时获得了极高的诱导效率，并可以得到高质量的具有生殖系传递能力的诱导多能干细胞。

主权项

一种将微小核糖核酸簇用于改变细胞命运的方法，该方法包含以下步骤：步骤1：从供体基因组中克隆miRNA或miRNA簇的基因并获取供体细胞，其中从供体基因组中克隆miRNA或miRNA簇的基因步骤如下：步骤11：设计特异的miRNA或miRNA簇的引物；步骤12：通过聚合酶链式反应从供体基因组中扩增miRNA或miRNA簇基因，并通过分子克隆手段克隆到基因载体；步骤2：利用步骤1中的miRNA或miRNA簇将步骤1中分离出的供体细胞的细胞命运改变；步骤21：将miRNA或miRNA簇以及多能干细胞诱导因子导入步骤1中的供体细胞；步骤22：采用相应的培养基对经过步骤21处理后得到的诱导多能干细胞进行培养；步骤23：将步骤22中出现的胚胎干细胞样克隆挑选出来，采用干细胞培养基培养。