[发明专利]一种凝胶层析制备壳寡糖单体的方法

摘要

一种凝胶层析制备壳寡糖单体的方法，其特征在于，其步骤如下：将壳寡糖以20-70%的质量浓度溶于双重蒸馏水中，待完全溶解后，抽滤，滤液即为壳寡糖溶液；将壳寡糖溶液上样于凝胶层析柱，用双重蒸馏水洗脱，用自动部分收集器每30分钟收集一管，每管取0.1ml，丙酮沉淀后，将沉淀用蒸馏水溶解，然后用TLC快速检测，确定每管所含壳寡糖单体的种类；每管另取少量液体冷冻干燥，称固形物含量，以确定每管所含的壳寡糖的浓度，绘制洗脱曲线；分离得到含有壳寡糖单体的溶液；减压浓缩，冷冻干燥，得各壳寡糖单体。本发明成本低，操作简单、方便，技术路线成熟，制备的壳寡糖单体纯度高，可作为标准品使用，也可作为研究用生化试剂。

主权项

一种凝胶层析制备壳寡糖单体的方法，其特征在于，其步骤如下：（1）壳寡糖溶液的配制：以聚合度为2‑15且其中聚合度为2‑7的占其质量的90%以上、脱乙酰度大于90%的壳寡糖为原料，将壳寡糖以20‑70%的质量浓度溶于双重蒸馏水中，待完全溶解后，抽滤，滤液即为壳寡糖溶液；（2）将壳寡糖溶液上样于凝胶层析柱，用双重蒸馏水洗脱，流速为15‑100ml/h；用自动部分收集器每30分钟收集一管，每管取0.1ml，丙酮沉淀后，将沉淀用蒸馏水溶解，然后用TLC快速检测，确定每管所含壳寡糖单体的种类；每管另取少量液体冷冻干燥，称固形物含量，以确定每管所含的壳寡糖的浓度，绘制洗脱曲线；分离得到分别含有壳二糖、壳三糖、壳四糖、壳五糖和壳六糖单体的溶液；（3）把上述壳寡糖单体溶液于40℃减压浓缩，得浓缩液，冷冻干燥，得各壳寡糖单体。