[发明专利]自交不结实海雀稗秋水仙素诱导体细胞突变体的筛选方法

摘要

本发明涉及一种自交不结实海雀稗秋水仙素诱导体细胞突变体的筛选方法，属于农业生物技术领域。海雀稗颗粒状愈伤组织在愈伤组织继代培养基上增殖培养20d～25d，转到添加500~1000g/L秋水仙素的愈伤组织继代培养基中诱变培养24h，转到分化培养基上培养35d~40d，绿苗和绿芽再转到分化培养基上继续生长，具有3张完整叶的再生植株移栽至大田或盆钵，移栽第2年成熟期，检查结实性获得可自交结实的体细胞突变体植株，收获的种子播种后能100%发芽长成具有完整根、茎、叶的植株，并能正常分蘖和成坪。本发明适用于海雀稗新品种选育，具有操作简便、周期短和选择效率高的优点。

主权项

自交不结实海雀稗秋水仙素诱导体细胞突变体的筛选方法，其特征在于，1） 材料 选用海雀稗幼穗为外植体，以幼穗诱导产生的白色或淡黄色颗粒状愈伤组织为供体材料；2）培养基 基本培养基：由MS无机盐、B5有机成分组成，添加蔗糖30g/L；愈伤组织继代培养基：基本培养基附加2，4‑二氯苯氧乙酸 2.0 mg/L，6‑苄基氨基嘌呤 0.05mg/L，琼脂条16g/L；愈伤组织分化培养基：基本培养基附加6‑苄基氨基嘌呤 2.0 mg/L，琼脂条8g/L；上述培养基在高压灭菌前用氢氧化钠和盐酸调pH值至5.8~6.0；3）方法 将白色或淡黄色颗粒状愈伤组织在继代培养基上进行增殖培养20d~25d，转入添加500～1000 mg/L秋水仙素的愈伤组织继代培养基中，24h后转移到愈伤组织分化培养基，在光照条件下培养35d~45d，绿苗和绿芽再转到分化培养基上继续生长，具有完整3片叶的再生植株移栽至大田或盆钵，经过一个冬季春化作用后，至第2年成熟期，检查结实性获得种子；离体培养条件：培养室温度为26℃～28℃，光强为2000 Lux，光照时间为16h/d。