[发明专利]一种检测DNA主动去甲基化的方法有效
| 申请号： | 201110077002.7 | 申请日： | 2011-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN102719518A | 公开（公告）日： | 2012-10-10 |
| 发明（设计）人： | 马端;张进;王慧君;杨璐 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/02;C12Q1/66;C12N15/63;C12N15/117;C12N5/10 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 吴桂琴 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明属生物技术领域，涉及一种基因诱导DNA去甲基化的检测方法。本发明利用筛选的已确定甲基化状态的细胞株为基础，收集基因与细胞株的混合克隆并测定其DNA甲基化的状态，对比未转基因的细胞株甲基化状态，得到检测结果。本发明还通过构建人工CpG岛报告基因载体PCBS-luc，体外使用甲基转移酶M.SssI对载体进行甲基化处理，并与anti-hygromycin基因表达载体共转HEK293细胞，使用潮酶素B筛选出完全甲基化、部分甲基化和非甲基化的PCBS稳定整合细胞株。本发明可用于观察目标蛋白去甲基化的功能、检测DNA甲基化或去甲基化的功能、观察组蛋白修饰与DNA甲基化之间的关系，还可用于研究环境因子对于细胞DNA甲基化的影响。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 dna 主动 甲基化 方法 | ||
【主权项】：
一种检测DNA主动去甲基化的方法，其特征在于，利用筛选的已确定甲基化状态的细胞株为基础，收集基因与细胞株的混合克隆并测定其DNA甲基化的状态，对比未转基因的细胞株甲基化状态，得到检测结果；其包括以下步骤：1）构建人工CpG岛报告基因载体PCBS‑luc并体外甲基化处理；2）筛选单克隆稳转细胞株；3）鉴定步骤2）获得的单克隆稳转细胞株；4）检测DNA主动去甲基化。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于复旦大学，未经复旦大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201110077002.7/，转载请声明来源钻瓜专利网。
