[发明专利]一种检测化合物对人Ⅰ型PI3Ks抑制活性的方法有效
| 申请号： | 201110077540.6 | 申请日： | 2011-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN102719517A | 公开（公告）日： | 2012-10-10 |
| 发明（设计）人： | 蒙凌华;王祥;丁健 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海药物研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/48 | 分类号： | C12Q1/48;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 北京金信立方知识产权代理有限公司 11225 | 代理人： | 朱梅;徐琳 |
| 地址： | 201203 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种检测化合物对人I型PI3K抑制活性的方法，该方法包括：使用激酶体外反应体系在分子水平测定化合物对人I型PI3K的四种亚型的抑制活性，其中，使用生物素标记的磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸作为底物进行体外反应；和/或构建Grp1-PH-EGFP高表达细胞株以绿色荧光在细胞膜上聚集程度为指标在细胞水平检测化合物对人I型PI3K的抑制活性；和/或构建表达持续活化的人I型PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kγ或PI3Kδ的各亚型细胞株，以磷酸化的Akt为指标，在细胞水平检测所述化合物对人I型PI3K各亚型的选择性。本发明的PI3K抑制剂的活性检测方法系统、准确、经济且安全性好。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 化合物 pi3ks 抑制 活性 方法 | ||
【主权项】：
一种检测化合物对人I型PI3K抑制活性的方法，该方法包括：1)使用激酶体外反应体系在分子水平测定化合物对人I型PI3K的四种亚型的抑制活性，其中，使用生物素标记的磷脂酰肌醇‑4，5‑二磷酸作为底物进行体外反应；和/或2)构建Grp1‑PH‑EGFP高表达细胞株以绿色荧光在细胞膜上聚集程度为指标在细胞水平检测化合物对人I型PI3K的抑制活性；和/或3)构建表达持续活化的人I型PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kγ或PI3Kδ的各亚型细胞株，以磷酸化的Akt为指标，在细胞水平检测所述化合物对人I型PI3K各亚型的选择性。
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