[发明专利]一种基于微孔板法的纤维素酶活测定方法无效
申请号: | 201110080567.0 | 申请日: | 2011-03-31 |
公开(公告)号: | CN102230887A | 公开(公告)日: | 2011-11-02 |
发明(设计)人: | 梁剑平;李兆周;王学红;尚若峰;郭文柱;郭志廷;郝宝成;王曙阳;陶蕾 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31 |
代理公司: | 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 | 代理人: | 夏晏平 |
地址: | 730070 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | 一种基于微孔板法的纤维素酶活测定方法,涉及生物化学领域,具体是基于微孔板法对纤维素酶的活性进行高通量测定的方法。步骤为:1)葡萄糖标准曲线的建立,2)样品酶活力测定,3)根据样品酶的吸光度,从葡萄糖标准曲线中查出相应的葡萄糖含量,根据生成的葡萄糖克数计算酶活值,适用于滤纸酶、纤维素内切酶、纤维素外切酶和β-葡萄糖苷酶等的活力测定,具有操作方便、快速、所需设备简单、易于推广等特点。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 微孔 纤维素酶 测定 方法 | ||
【主权项】:
一种基于微孔板法的纤维素酶活测定方法,其特征是,步骤如下:1)葡萄糖标准曲线的建立:取PCR微孔板,每孔内加缓冲液及不同浓度的葡萄糖标准溶液,然后在每孔中加入DNS溶液,90 ℃‑100 ℃孵育5 min‑15 min;而后从每孔中转移出部分孵育溶液置于平底酶标板中,用酶标仪测定吸光度;以此得标准曲线;2)样品酶活力测定:于PCR微孔板中,每孔内加缓冲液、酶液及底物,45 ℃‑55 ℃孵育30 min‑60 min,然后在每孔中加入DNS溶液,90 ℃‑100 ℃孵育5 min‑15 min;而后从每孔中转移出部分孵育溶液置于平底酶标板中,用酶标仪测定吸光度;3)根据样品酶的吸光度,从葡萄糖标准曲线中查出相应的葡萄糖含量,根据生成的葡萄糖克数计算酶活值。
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