[发明专利]一种三疣梭子蟹微卫星标记的六重PCR检测方法

摘要

本发明提供了一种三疣梭子蟹微卫星标记的六重PCR检测方法，它包括设计和合成六重PCR引物；提取基因组DNA；六重PCR反应；检测PCR产物，六重PCR反应包括六重PCR反应体系和六重PCR反应程序。本发明建立了进行三疣梭子蟹家系和亲子鉴定的六重PCR反应体系，实现了在一个PCR反应中同时检测6个微卫星位点，因此与原有的PCR方法相比效率提高了6倍左右。本发明具有高效、经济、简便易行等特点，可以在三疣梭子蟹遗传多样性分析、亲缘关系鉴定、家系管理和良种选育进行推广应用。

主权项

一种三疣梭子蟹微卫星标记的六重PCR检测方法，它包括：(1)设计和合成六重PCR引物；(2)提取基因组DNA；(3)六重PCR反应；(4)检测PCR产物，其特征在于所述六重PCR反应包括六重PCR反应体系和六重PCR反应程序，所述六重PCR反应体系的引物为Ptr33a、Ptr95、Pot34、Pot42、Pot44和Pot57的组合，所述各引物序列如下：Ptr33a：F：ACAACGCCAACAATAGCA        R：CACCGCACTTTACAGCAC；Ptr95：F：CCTTGCCTTTCACTATACAC       R：GACCCACTTGTTATCGTTTTPot34：F：AGGAATGGTTGCAAAGATCG       R：TGCGACTTGACACTCACCTCPot42：F：TCATCACACAGGCTCACTCA       R：CATCTTCCACCTTCCTCCAAPot44：F：ATTCACTTATTCGCACTGCT       R：GCAAGGGAAAATAGAAGACAPot57：F：TCTCATTTTCTCCCCCTCCT       R：TCCTCCTTTCTGCTGACCAC