[发明专利]一种用酶标法测定海马幼苗组织消化酶活力的方法

摘要

本发明涉及一种用酶标法测定海马幼苗组织消化酶活力的方法，包括：1)将冰冻海马幼苗加入到容器中，冰浴下再加入0.7％NaCl的生理盐水或匀浆介质后，用多功能样品均质器匀浆，离心机离心，取上清液备用；2)取部分上述上清液测定组织总蛋白浓度；3)取容器A、B，分别加入底物淀粉缓冲液，再向B中加入步骤1)所得上清液，然后分别在A、B中各加入碘反应液和蒸馏水；4)吸取A、B中溶液分别滴入酶标板的两个孔中；随后将上述的酶标板放入酶标仪中，同时检测两孔中溶液的吸光度；5)最后计算样品的淀粉酶活力。本发明的方法操作简单，成本低廉，效率高，且环保无污染。

主权项

一种用酶标法测定海马幼苗组织消化酶活力的方法，包括：1)将冰冻海马幼苗10‑20mg加入到容器中，冰浴下再加入90‑180μl 2‑4℃左右的0.7％g/mlNaCl的生理盐水或匀浆介质后，匀浆成匀浆液，然后再于冷冻离心机中0‑4℃9000‑10000rpm下离心10min，取上清液备用；2)取上述上清液，采用考马斯亮蓝法测定组织总蛋白浓度，其中牛血清白蛋白为标准蛋白；3)取两个干净的容器A、B，分别加入等体积的试剂盒中的“底物淀粉缓冲液”50ul，再向B中加入步骤1)所得上清液10ul，并震荡B；然后将A、B于37℃恒温水浴中加热7.5min后再各加入浓度为0.01mol/L的碘反应液50ul，最后在A、B中各加入蒸馏水300‑310ul，使得A、B中溶液的体积相等，再同时震荡A、B；4)从上述A、B中各吸取等体积的溶液，分别滴入酶标板的两个孔中；将酶标仪波长调至660nm，随后将上述的酶标板放入酶标仪中，同时检测两孔中溶液的吸光度；5)最后计算样品的淀粉酶活力。