[发明专利]大鼠GSK-3β目的基因过表达慢病毒载体构建与鉴定无效
申请号: | 201110088018.8 | 申请日: | 2011-04-08 |
公开(公告)号: | CN102212535A | 公开(公告)日: | 2011-10-12 |
发明(设计)人: | 单云峰;谢元康 | 申请(专利权)人: | 单云峰 |
主分类号: | C12N15/54 | 分类号: | C12N15/54;C12N15/85;C12N15/867;C12Q1/68;G01N33/68 |
代理公司: | 温州瓯越专利代理有限公司 33211 | 代理人: | 张瑜生 |
地址: | 325000 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种大鼠GSK-3β目的基因过表达慢病毒载体的构建,利用PCR方法钓取GSK-3β目的基因,将GSK-3β目的基因与酶切线性化的载体进行定向交换,其产物转化细菌感受态细胞,对长出的克隆进行菌落PCR鉴定,再对PCR鉴定阳性的克隆测序;本发明还公开了一种大鼠GSK-3β目的基因过表达慢病毒载体的鉴定,将目的基因过表达慢病毒载体、空病毒载体和生理盐水转染大鼠WB-F344细胞,达到最佳感染复数后,在观察荧光蛋白的表达,采用WesternBlot检测表达情况。本发明将使我们深入了解GSK-3β在机体及其相关疾病中的作用机制,更好了解这些疾病的发病机理,为其在未来的临床应用奠定基础。 | ||
搜索关键词: | 大鼠 gsk 目的 基因 表达 病毒 载体 构建 鉴定 | ||
【主权项】:
一种构建大鼠GSK‑3β目的基因过表达慢病毒载体改造用DNA序列,其特征在于:所述的DNA序列包括GSK‑3β目的基因的DNA序列,GSK‑3β目的基因序列如序列1所示。
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