[发明专利]具有增强的热稳定性的新颖的T7 RNA聚合酶变体

摘要

本发明通过导入新颖突变，提供了T7RNA聚合酶的改良变体，所述突变导致所述酶的提高的热稳定性。根据本发明，在位置Val426、Ser633、Val650、Thr654、Ala702、Val795及其组合处的氨基酸置换是有利的。

主权项

T7 RNA聚合酶的变体多肽(T7变体)，所述T7变体的特征在于：(i) DNA‑依赖性的RNA聚合酶活性，(ii) 与SEQ ID NO:2的883‑氨基酸T7 RNA聚合酶多肽(野生型参照)相比增强的热稳定性，和(iii) 与野生型参照相比不同的氨基酸组成，其中所述变体包含野生型参照的多肽，其中至少一个氨基酸和在不同位置的最多达4个氨基酸被置换，其中用不同的氨基酸置换选自Val426、Ser633、Val650、Thr654、Ala702和Val795的氨基酸，它们从野生型参照的N‑端开始编号，且其中所述不同的氨基酸选自：● 当用不同的氨基酸置换Val426时Leu、Ile和Phe (Val426Leu、Val426Ile、Val426Phe)，● 当用不同的氨基酸置换Ser633时Val和Met (Ser633Val、Ser633Met)，● 当用不同的氨基酸置换Val650时Leu (Val650Leu)，● 当用不同的氨基酸置换Thr654时Leu (Thr654Leu)，● 当用不同的氨基酸置换Ala702时Val (Ala702Val)，● 当用不同的氨基酸置换Val795时Ile (Val795Ile)。