[发明专利]一种阿魏酸酯酶A突变体及其用途有效
申请号: | 201110102026.3 | 申请日: | 2011-04-22 |
公开(公告)号: | CN102220299A | 公开(公告)日: | 2011-10-19 |
发明(设计)人: | 吴中柳;张帅兵;裴小琼;刘艳 | 申请(专利权)人: | 中国科学院成都生物研究所 |
主分类号: | C12N9/18 | 分类号: | C12N9/18;C12N15/81;C12R1/84;C12R1/685 |
代理公司: | 成都赛恩斯知识产权代理事务所(普通合伙) 51212 | 代理人: | 肖国华 |
地址: | 610041 *** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明属于基因工程和酶工程技术领域,具体涉及一种阿魏酸酯酶A突变体及其用途。本发明利用易错PCR对阿魏酸酯酶A母本基因随机突变,构建随机突变文库,通过高通量筛选体系筛选出12个耐热性提高的阿魏酸酯酶A突变体位点,并通过全序列合成方法将这12个突变位点整合到一条编码序列上,获得组合突变体。该组合突变体比母本的热稳定性有极大提高,显示出在生物能源、饲料、造纸、保健食品,医药等工业中潜在的应用价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 阿魏酸 突变体 及其 用途 | ||
【主权项】:
一种阿魏酸酯酶A突变体,其特征在于:以SEQ ID NO.2所示的阿魏酸酯酶A氨基酸序列为基础,经突变后具有以下突变位点的氨基酸序列:将其第14位的亮氨酸突变为苯丙氨酸或/和第35位的苏氨酸突变为异亮氨酸或/和第37位的赖氨酸突变为异亮氨酸或/和第57位的苏氨酸突变为异亮氨酸或/和第63位的苏氨酸突变为异亮氨酸或/和第121位的谷氨酰胺突变为组氨酸或/和第140位的丙氨酸突变为苏氨酸或/和第163位的丝氨酸突变为苏氨酸或/和第177位的谷氨酰胺突变为组氨酸或/和第178位的缬氨酸突变为丙氨酸或/和第185位的谷氨酰胺突变为精氨酸或/和第235位的半胱氨酸突变为丝氨酸。
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