[发明专利]一种利用化学杀雄剂高效活体转化基因的方法无效
申请号: | 201110116282.8 | 申请日: | 2011-05-06 |
公开(公告)号: | CN102212552A | 公开(公告)日: | 2011-10-12 |
发明(设计)人: | 付东辉;魏大勇;钱伟;李加纳 | 申请(专利权)人: | 西南大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12Q1/68;A01H5/00 |
代理公司: | 重庆弘旭专利代理有限责任公司 50209 | 代理人: | 周韶红 |
地址: | 400716 *** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明涉及化学杀雄、花粉管通道和花粉介导转化技术,属于分子育种和基因工程技术领域。本发明首先对现蕾期的农作物T0进行化学杀雄处理,再将花蕾进行柱头切除,接着利用花粉管通道技术,即用OD600=0.8的含有靶基因的农杆菌侵染液(附加5%蔗糖,500μL/L的SilwetL-77)混合可育花粉,用脱脂棉球蘸取菌液涂抹到切除柱头的子房上,遮光处理三天后正常生长,最后收取自交种。将T1代进行除草剂抗性筛选,对抗性植株进行PCR检测,确定阳性植株。本发明方法具有成本低、操作简单、不需要昂贵仪器设备和转化效率高等特点,转化率达1%-5%,适合于任何开花植物并可应用到大规模的农作物遗传转化中。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 化学 杀雄剂 高效 活体 转化 基因 方法 | ||
【主权项】:
一种利用化学杀雄剂高效活体转化基因的方法,其特征在于,首先在植物现蕾期对可育植株进行化学杀雄,对杀雄后的不育植株进行柱头切除,取未经化学杀雄的同一材料的可育单株的花粉,加入含有靶基因的农杆菌菌液,然后通过花粉管通道技术和花粉介导法进行授粉,遮光处理三天,之后正常生长,收获自交种;将收获的种子种植于田间,进行抗除草剂筛选和PCR检测,最后进行阳性植株鉴定。
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