[发明专利]构建严谨型T7表达系统宿主菌的方法有效
申请号: | 201110128885.X | 申请日: | 2011-05-18 |
公开(公告)号: | CN102286518A | 公开(公告)日: | 2011-12-21 |
发明(设计)人: | 陈建群;丁静;张莹;王强 | 申请(专利权)人: | 南京大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/90;C12R1/19 |
代理公司: | 南京天翼专利代理有限责任公司 32112 | 代理人: | 陈建和 |
地址: | 210093 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种构建严谨型T7表达系统宿主菌的方法。利用内含肽反式剪接构建严谨型T7表达系统宿主菌,将T7RNA聚合酶分解为氨基末端即N端聚合酶与羧基末端即C端聚合酶,选择一个内含肽I,将内含肽I也分解为氨基末端即N端与羧基末端即C端的内含肽I;将这两个氨基末端的聚合酶与内含肽I融合,在这个基因上游融合常用启动子及其控制基因;同样的,将这两个羧基末端的聚合酶与内含肽I融合融合,在这个基因上游融合一个常用启动子及其控制基因;将这两个融合部分插入大肠杆菌的染色体或低拷贝数质粒中,就得到了严谨型T7表达系统宿主菌。 | ||
搜索关键词: | 构建 严谨 t7 表达 系统 宿主 方法 | ||
【主权项】:
构建严谨型T7表达系统宿主菌的方法,利用内含肽反式剪接,构建严谨型T7表达系统宿主菌,其特征是将T7 RNA聚合酶分解为氨基末端即N端聚合酶与羧基末端即C端聚合酶,选择一个内含肽I,将内含肽I也分解为氨基末端即N端与羧基末端即C端的内含肽I;将这两个氨基末端的聚合酶与内含肽I融合,在这个基因上游融合常用启动子及其控制基因;同样的,将这两个羧基末端的聚合酶与内含肽I融合融合,在这个基因上游融合一个常用启动子及其控制基因;将这两个融合部分插入大肠杆菌的染色体或低拷贝数质粒中,就得到了严谨型T7表达系统宿主菌。
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