[发明专利]蜕膜、胎盘间充质干细胞(MSC)的快速获取以及小分子修饰的基因工程应用

摘要

本发明属于生物医药领域，公开了一种快速有效获得蜕膜及胎盘间充质干细胞(MSC)并通过小核糖核酸和孕酮激素等小分子处理对MSC进行体外修饰的方法。特征是通过一种优化蜕膜及胎盘组织消化酶配方和消化细胞贴壁的方式，快速有效利用新生胎儿的蜕膜及胎盘为资源获取蜕膜及胎盘MSC，并采用miRNA143、miRNA181a以及孕酮对MSC进行修饰，使MSC免疫调节能力得到进一步加强。本方法优化了现有的蜕膜及胎盘间充质干细胞获取方法，并首次通过小核糖核酸和激素对MSC进行修饰，从而有效提高了MSC的免疫调节功能。为蜕膜及胎盘MSC的科研和临床运用提供一种科学的快速有效的获取和修饰方法。

主权项

一种专门用于蜕膜及胎盘组织消化的酶：CDH消化酶，该酶在较短的时间内可以充分的将蜕膜及胎盘组织消化，对组织块粉碎的要求较低，且消化液不粘稠，更容易冲洗离心获取MSC细胞。这种消化液的特征是含有II型胶原酶250U/ml，中性蛋白酶100U/ml，透明质酸酶10U/ml，37度溶解于DMEM/F12培养基，过滤0.22μm的滤器除菌备用。消化酶最好现配现用，在4度保存时间勿超过1周。