[发明专利]一种甲型副伤寒沙门菌脉冲场凝胶电泳方法无效
| 申请号： | 201110137040.7 | 申请日： | 2011-05-25 |
| 公开（公告）号： | CN102305823A | 公开（公告）日： | 2012-01-04 |
| 发明（设计）人： | 韩辉;李海山;陈春霞;胡群;徐宝梁;姚李四;杨宇;王艳;李新;张晓龙 | 申请（专利权）人： | 中国检验检疫科学研究院 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447 |
| 代理公司： | 北京万科园知识产权代理有限责任公司 11230 | 代理人： | 张亚军;刘俊玲 |
| 地址： | 100123 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种甲型副伤寒沙门菌脉冲场凝胶电泳方法，以经分离得到的甲型副伤寒沙门菌为分析样品，依次进行以下各步骤：胶块制备、细胞裂解、洗胶块、胶块内DNA的酶切、加样和电泳；其中，所述的胶块制备、细胞裂解、洗胶块和加样步骤都按照常规脉冲场凝胶电泳方法进行；所述的胶块内DNA的酶切是以Spe I作为首选酶，Xba I作为次选酶，Xho I作为第三种酶；所述的电泳参数中，Spe I酶对应的脉冲时间为1-20s，19-20h；Xba I酶对应的脉冲时间为1.5-29s，19-20h；Xho I酶对应的脉冲时间为2.2-29s，19-20h。本发明的方法对甲型副伤寒沙门菌的分辨率相对现有技术显著提高，能够有效的应用于甲型副伤寒沙门菌的分子分型或基因组变异的检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 副伤寒 沙门 脉冲 凝胶电泳 方法 | ||
【主权项】：
一种甲型副伤寒沙门菌脉冲场凝胶电泳方法，以经分离并培养得到的甲型副伤寒沙门菌为分析样品，依次进行以下各步骤：胶块制备、细胞裂解、洗胶块、胶块内DNA的酶切、加样和电泳；所述的胶块制备、细胞裂解、洗胶块和加样步骤都按照常规脉冲场凝胶电泳方法进行；其特征在于：所述的胶块内DNA的酶切是以Spe I作为首选酶，Xba I作为次选酶，XhoI作为第三种酶；所述的电泳参数中，Spe I酶对应的脉冲时间为1‑20s，总电泳时间为19‑20h；Xba I酶对应的脉冲时间为1.5‑29s，总电泳时间为19‑20h；Xho I酶对应的脉冲时间为2.2‑29s，总电泳时间为19‑20h。
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