[发明专利]一种结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药突变的检测方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201110137819.9 | 申请日： | 2011-05-25 |
| 公开（公告）号： | CN102229989A | 公开（公告）日： | 2011-11-02 |
| 发明（设计）人： | 李庆阁;胡思玉;陈晓云;付军;那巴古·耶罕姆 | 申请（专利权）人： | 厦门大学;厦门致善生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/02;G01N21/64 |
| 代理公司： | 厦门南强之路专利事务所 35200 | 代理人： | 马应森;何加友 |
| 地址： | 361005 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 一种结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药突变的检测方法及试剂盒。涉及结核分枝杆菌耐药突变的检测技术，提供一种设计简单，可简化操作、提高分析灵敏度、成本低廉的结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药突变的检测方法及试剂盒。提取结核分枝杆菌样本的DNA；根据结核分枝杆菌embB基因序列，利用引物设计软件PrimerPremier 5设计引物和探针；构建PCR反应体系，进行PCR检测；进行熔解曲线分析及检测结果判断：通过分析熔解曲线的Tm变化确定该探针所覆盖区域是否发生突变。采用3对引物4条探针建立双管双色体系体系从而实现对位于embB基因上的6个密码子306、368、378、380、406和497的突变检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 结核 分枝杆菌 乙胺 丁醇 耐药 突变 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药突变的检测方法，其特征在于包括以下步骤：1)提取结核分枝杆菌样本的DNA；2)根据结核分枝杆菌embB基因序列，利用引物设计软件Primer Premier 5设计引物和探针；3)构建PCR反应体系，进行PCR检测；4)进行熔解曲线分析及检测结果判断：通过分析熔解曲线的Tm变化确定该探针所覆盖区域是否发生突变。若待测样品熔解曲线峰的Tm比阳性对照的低2℃以上，说明存在突变。
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