[发明专利]一种检测食品中腐败菌氨基酸脱羧酶活性的方法

摘要

一种检测食品中腐败菌氨基酸脱羧酶活性的方法，属农产品技术领域，先从食品中分离出腐败菌，经发酵取得菌株发酵液，再接种到含有氨基酸的液体培养基中，取得生物胺检测用腐败菌发酵液，再通过离心取得无菌体的上清，在上清和生物胺混合标准溶液中分别加入Na2HPO4、NaOH和丹磺酰氯，在水浴避光条件下分别取得腐败菌生物胺的衍生样品和标准生物胺的衍生样品；经点样干燥后，置入展开槽内，待展开剂扩展到距样点17cm处取出干燥，然后在紫外灯下使用自动凝胶成像分析分别拍照，通过比对，根据Rf值确定样品中生物胺的种类，判断菌株的氨基酸脱羧酶活性。本发明方便快捷，成本较低，可以准确实现对生物胺的定性检测。

主权项

一种检测食品中腐败菌氨基酸脱羧酶活性的方法，其特征在于包括以下步骤：1）从食品中分离出腐败菌，经发酵取得菌株发酵液，将菌株发酵液按照1%接种量接种到含有氨基酸的液体培养基中，取得生物胺检测用腐败菌发酵液，再通过离心取得无菌体的上清，在上清和生物胺混合标准溶液中分别加入Na2HPO4、NaOH和丹磺酰氯溶液，然后在55℃水浴避光条件下分别取得腐败菌生物胺的衍生样品和标准生物胺的衍生样品；2）将G60硅胶板在105℃下活化；3）将由氯仿、乙醚和三乙胺混合制成的展开剂预饱和；4）使用自动点样台点样，腐败菌生物胺的衍生样品和标准生物胺的衍生样品的上样量为2µL，间隔1.5cm，待样点干燥后，置入展开槽内，待展开剂扩展到距样点17cm处取出，通风厨内干燥，在366nm紫外灯下使用自动凝胶成像分析分别拍照，通过比对，根据Rf值确定样品中生物胺的种类，判断菌株的氨基酸脱羧酶活性。