[发明专利]一种新型抗凝溶栓双功能融合蛋白的高效表达无效
| 申请号： | 201110141067.3 | 申请日： | 2011-05-30 |
| 公开（公告）号： | CN102250992A | 公开（公告）日： | 2011-11-23 |
| 发明（设计）人： | 余蓉;梁兰;杨继虞 | 申请（专利权）人： | 四川大学 |
| 主分类号： | C12P21/00 | 分类号： | C12P21/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 610041 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明属于生物制药领域，具体涉及到一种新型抗凝溶栓双功能融合蛋白——水蛭素12肽和瑞替普酶融合蛋白(HV12p-rPA)的高效表达。高效表达法通过优化表达HV12p-rPA蛋白的大肠杆菌的7个培养条件，证明摇床转速即通风量和微量元素对表达量提高有显著影响，使其提高到约29%。本方法简单、易行、高效，不提高成本，对实验室规模或商业化生产均有较好应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 新型 抗凝 溶栓双 功能 融合 蛋白 高效 表达 | ||
【主权项】：
一种高效表达水蛭素12肽和瑞替普酶融合蛋白(HV12p‑rPA)的方法，其特征在于：优化表达该融合蛋白的大肠杆菌的培养条件（培养基组成、接种量、诱导时间、摇床转速即通风量、诱导温度和微量元素），建立了一套使表达量提到高30%的培养条件，即：在蒸馏水配制的LB培养基（含Amp浓度为100ug/ml）中，按照5%的接种量加入菌种，37℃，200r/min恒温培养3h后，加入诱导剂IPTG使终浓度为1mmol/L，再以 200r/min，39℃恒温诱导4h，可获得表达量约为29%的水蛭素12肽与r‑PA融合蛋白。
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