[发明专利]一种动物细胞放大培养的方法有效
| 申请号： | 201110149192.9 | 申请日： | 2011-06-03 |
| 公开（公告）号： | CN102807964A | 公开（公告）日： | 2012-12-05 |
| 发明（设计）人： | 王建超;高飞;陈文庆;张韧 | 申请（专利权）人： | 北京清大天一科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/07 | 分类号： | C12N5/07;C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京银龙知识产权代理有限公司 11243 | 代理人： | 钟晶;於毓桢 |
| 地址： | 102200 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明为一种动物细胞放大培养的方法。该方法包括以下步骤：1)在细胞工厂中培养动物细胞；2)对所培养的细胞进行消化，包括：2-1)去除培养液，用pH7.4-8.0的洗涤液洗涤所培养的细胞；2-2)去除该洗涤液，加入pH7.4-8.0的消化液，使消化液均匀流至每层，在36-38℃进行细胞消化，消化液用量为20-80mL/层，当大于60％的细胞从细胞培养表面上脱落时，去除部分消化液，剩余10-35体积％消化液继续消化；2-3)当大于85％的细胞从培养表面上脱落时，加入含血清或消化液抑制剂的新鲜细胞培养液终止消化并重悬细胞，重复加入1-3次该培养液；3)将所得细胞悬液接种至生物反应器中进行培养。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 动物 细胞 放大 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种动物细胞放大培养的方法，其包括以下步骤：1)在细胞工厂中培养动物细胞；2)对步骤1)中在细胞工厂中培养的细胞进行消化，其包括以下步骤：2‑1)洗涤：去除细胞工厂中的细胞培养液，用pH7.4‑8.0的洗涤液洗涤所培养的细胞；2‑2)消化：去除步骤2‑1)所述洗涤液，向细胞工厂中加入pH7.4‑8.0的消化液，轻轻前后晃动细胞工厂确保消化液均匀流至每层，在36℃‑38℃进行细胞消化，其中，所使用消化液用量为20mL/层‑80mL/层，当大于60％的动物细胞从细胞工厂培养表面上脱落时，去除部分消化液，剩余10体积％‑35体积％消化液继续消化。2‑3)收获：当大于85％的动物细胞从细胞工厂培养表面上脱落时，向细胞工厂内加入含血清的或含消化液抑制剂的新鲜细胞培养液终止消化并重悬细胞，重复加入1‑3次所述新鲜细胞培养液并收集所得细胞悬液；3)将步骤2)中所获得的细胞悬液接种至生物反应器中，进行生物反应器微载体培养。
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