[发明专利]一种甲胺磷人工抗原的制备方法无效
| 申请号： | 201110149802.5 | 申请日： | 2011-06-07 |
| 公开（公告）号： | CN102241766A | 公开（公告）日： | 2011-11-16 |
| 发明（设计）人： | 董全;李垚辛;杜小粉;朱开祥 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | C07K14/765 | 分类号： | C07K14/765;C07K14/77;C12N9/08 |
| 代理公司： | 重庆弘旭专利代理有限责任公司 50209 | 代理人： | 周韶红 |
| 地址： | 400716 *** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 一种甲胺磷人工抗原的制备方法，选用重氮化法，在弱酸环境下，利用亚硝酸盐先将甲胺磷分子上的氨基转化为重氮基团，再在碱性环境中利用重氮基团与蛋白质上的羧基反应将甲胺磷小分子与蛋白质分子偶联。在重氮键合成时，保持微酸环境，重氮溶液加入到蛋白质溶液中，缓慢连续搅拌可以使其反应充分，增加偶联物的结合比。本发明操作简便，试剂价廉，比一般方法节省成本15％，并且一步完成反应，人工抗原制备的效率提高3％～5％。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 甲胺磷 人工 抗原 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种甲胺磷人工抗原的制备方法，其特征在于，依次通过以下步骤实现：（1）将牛血清白蛋白BSA溶于pH9.0的硼酸盐缓冲液中，使BSA浓度达到0.01～0.03g/mL；（2）将甲胺磷溶于0.01mol/L的HCl溶液中，使甲胺磷浓度达到0.01～0.05g/mL，冰浴，边搅拌边缓慢加入预冷的0.1mol/L亚硝酸钠溶液，直至淀粉碘化钾试纸变蓝，继续搅拌反应30～60min；（3）将步骤（2）溶液缓慢加入到步骤（1）溶液中，使牛血清白蛋白与甲胺磷的摩尔比为1:500～1000，冰浴搅拌2h，4℃反应24h后，置于pH7.4的磷酸盐缓冲液中透析3～5d，每12h换一次透析液；最后冷冻干燥，即得到合成的甲胺磷人工抗原。
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