[发明专利]治疗咳喘病的中药组合物的检测方法

摘要

本发明公开了一种治疗咳喘病的中药组合物的检测方法。本发明中药组合物由射干、桔梗、淫羊藿、山楂(生)、等原料药组成，本发明组合物质量控制方法中采用高效液相色谱法对淫羊藿苷进行含量测定，对射干、桔梗、淫羊藿、黄芪、麻黄(炙)、地龙进行定性薄层鉴别。

主权项

一种治疗咳喘病的中药组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：选取如下原料药：射干20‑40重量份      桔梗10‑20重量份        淫羊藿30‑60重量份黄芪30‑50重量份      麻黄(炙)10‑20重量份    地龙10‑20重量份淮山药20‑40重量份    山楂(生)60‑80重量份；该检测方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种：鉴别A.取相当于原料药10‑50g该组合物制剂，研细，加甲醇40‑80ml，超声处理10‑60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20‑60ml使溶解，加正丁醇振摇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加1‑3ml甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取射干对照药材0.5‑2g，加甲醇10‑20ml，超声处理20‑60分钟，滤过，滤液浓缩至1ml作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液3‑10μl，对照药材溶液1‑5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷‑甲醇‑水(6‑10∶1‑5∶0.5‑2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；B.取相当于原料药40‑70g该组合物制剂，研细，加三氯甲烷10‑40ml，超声处理10‑60分钟，滤过，滤液浓缩至0.5‑2ml，作为供试品溶液；另取地龙对照药材0.5‑2g，加三氯甲烷10‑40ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述对照药材溶液3‑10μl，供试品溶液5‑20μl分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以环己烷‑乙酸乙酯(8‑12∶0.5‑2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；C.取相当于原料药40‑70g该组合物制剂内容物，研细，加1‑3％氢氧化钾甲醇溶液40‑60ml，称定重量，加热回流，保持微沸0.5‑2.0小时，滤过，滤液加三氯甲烷‑正丁醇(1‑3∶0.5‑2)混合溶液提取1‑3次，每次50ml，合并提取液，用正丁醇饱和的氨试液洗涤1‑3次，每次30‑50ml，弃去氨试液，三氯甲烷‑正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5‑2.0ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.1‑1.0mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液1‑5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷‑甲醇‑水(10‑20∶5‑10∶1‑5)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；D.取相当于原料药5‑20g该组合物制剂内容物，研细，加30‑70％乙醇30ml，加热回流10‑50分钟，取出，放冷，滤过，滤液蒸至近干，加水1‑5ml使溶解，加于聚酰胺柱(5g，柱径10～15mm)上，用水100ml洗脱，弃去洗脱液，再用乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇0.5‑2.0ml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.5‑2.0mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药黄2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以无水乙醇‑水(55∶44)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点；E.取相当于原料药20‑40g该组合物制剂内容物，研细，加浓氨试液2‑8ml使湿润，加氯仿20‑60ml，加热回流0.5‑2.0小时，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加氯仿制成每1ml含0.5‑2.0mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各3‑10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇‑正丁醇‑浓氨试液(10‑20∶1‑3∶1‑5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点；F.取相当于原料药20‑50g该组合物制剂内容物，加7％硫酸乙醇‑水(0.5‑2.0∶1‑5)混合溶液40ml，加热回流1‑5小时，放冷，加氯仿振摇提取1‑3次，每次10‑30ml，合并氯仿液，加水20‑40ml洗涤，弃去水液，氯仿液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1‑3ml使溶解，加活性碳适量处理，滤过，滤液作为供试品溶液；另取桔梗对照药材0.5‑2.0g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2‑10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿‑乙醚(0.5‑2.0∶0.5‑2.0)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；含量测定：淫羊藿的含量测定，色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇‑水(40‑60∶60‑40)为流动相；检测波长为200‑300nm；理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备：取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.05‑0.5mg的溶液，即得；供试品溶液的制备：取相当于原料药30‑50g本发明药物组合物制剂内容物，研细，取约0.5‑2.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇10‑20ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz)0.5‑2.0小时，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2‑10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每日服用剂量含淫羊藿以淫羊藿苷计，不得少于1.0‑5.0mg。