[发明专利]一种流动注射固定化酶抑制分析方法

摘要

本发明提供一种流动注射固定化酶抑制分析方法，利用具有循环回路的流动注射固定化酶分析系统，依据底物过量的酶反应进程曲线，得到有环境污染物抑制和无环境污染物抑制的响应信号差及其下降的过渡时刻两参数，参照标准关系曲线分析得到环境污染物的待测浓度；本发明的分析方法简便快速、自动化程度高、有效减少人为干扰，并能甄选和校正固定化酶；应用在存在抑制的酶促反应分析，尤其是农药残留、重金属等环境污染物的现场监测分析具有优势。

主权项

一种流动注射固定化酶抑制分析方法，采用具有循环回路的流动注射固定化酶分析系统，反应底物能循环流过反应器持续进行酶促反应，系统采用检测和参比两个回路，两回路为孪生结构，检测反应器和参比反应器中放置对环境污染物敏感的同批次固定化酶，在一定流量、温度、pH等分析条件下，使用检测器全程监测检测反应器和参比反应器的响应信号差，其特征在于，该分析方法包括下列步骤：(a)检测回路和参比回路分别通入样液和缓冲液，并循环流过检测反应器和参比反应器一定时间，对检测反应器中的固定化酶进行予抑制；(b)检测回路和参比回路同时引入定量、定浓度的过量底物，底物循环流过检测反应器和参比反应器持续进行酶促反应，检测器得到检测反应器和参比反应器的响应信号差，判断检测反应器和参比反应器响应信号差开始下降的时刻并作为过渡时刻；(c)通过参照过渡时刻‑初始酶活度的标准关系得到过渡时刻对应的固定化酶的初始酶活度，参照响应信号差‑环境污染物浓度的标准关系得到此初始酶活度下检测反应器和参比反应器中的响应信号差对应的待测环境污染物的浓度。