[发明专利]一种在肿瘤细胞表面合成α-半乳糖苷表位并激活免疫细胞的方法无效
申请号: | 201110159606.6 | 申请日: | 2011-06-04 |
公开(公告)号: | CN102286428A | 公开(公告)日: | 2011-12-21 |
发明(设计)人: | 云升;邱英 | 申请(专利权)人: | 内蒙古医学院 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09;C12N5/0783 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 010010 内蒙古自治区*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | 本发明涉及一种在肿瘤细胞表面合成α-半乳糖苷表位(α-Gal)并激活免疫细胞的方法,利用陈旧的、经福尔马林固定的或经石蜡包埋的肿瘤标本,经α-1,3-半乳糖苷转移酶催化,在肿瘤细胞膜上合成半乳糖苷(α-Gal)表位,增强肿瘤抗原性,并以此作为疫苗。这些肿瘤细胞膜上的α-Gal表位体外可被抗原呈递细胞(APC)吞噬,激活T/CIK细胞,同时体外快速扩增肿瘤特异性T/CIK细胞,这些免疫活性细胞可以特异性地杀伤体内肿瘤细胞。 | ||
搜索关键词: | 一种 肿瘤 细胞 表面 合成 半乳糖 苷表位 激活 免疫 方法 | ||
【主权项】:
一种在肿瘤细胞表面合成α‑半乳糖苷表位的方法,其特征在于其具体步骤为:从已用福尔马林固定或已用石蜡包埋的肿瘤组织中分离肿瘤细胞,用1ml组成为0.1M MES(PH 6.2),25mM MnCl2和1mM UDP‑gal的酶缓冲液将上述分离的肿瘤细胞重新悬浮,然后加入1mU神经氨酸酶,5U重组半乳糖苷转移酶(α‑1,3‑GT),在37℃、30分钟温浴,随后,分别用含有1mM EDTA的生理盐水和不含EDTA的生理盐水清洗2次,即得到细胞膜上已合成α‑半乳糖苷表位的肿瘤细胞。
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