[发明专利]一种农杆菌介导的纵切幼苗上胚轴顶端转化大豆的方法有效
申请号: | 201110160206.7 | 申请日: | 2011-06-15 |
公开(公告)号: | CN102329816A | 公开(公告)日: | 2012-01-25 |
发明(设计)人: | 何峰;张会新;孔祥凤;夏勉;张斌;郑辰 | 申请(专利权)人: | 北京未名凯拓作物设计中心有限公司 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00 |
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地址: | 100085 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供了一种农杆菌介导的纵切幼苗上胚轴顶端转化大豆的转基因方法,包括(a)浸泡大豆,光照保湿条件下培养至下胚轴长2~3cm;(b)将含有目的基因的农杆菌用渗透培养基悬浮,所述渗透培养基含有细胞分裂素KT、植物生长素2,4-D、抗氧化剂DTT和L-Cysteine;(c)在渗透培养基中,用薄刀刃在大豆的上胚轴顶端纵切,制造伤口;(d)致伤处理后的大豆幼苗浸没在渗透培养基中培养;(e)农杆菌侵染后的大豆幼苗在吸水纸上吸干水分,种入土中。该方法是一种无需经过组织培养阶段的农杆菌介导的大豆转化方法,具有比较高的实际应用价值和推广前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 杆菌 幼苗 胚轴 顶端 转化 大豆 方法 | ||
【主权项】:
一种农杆菌介导的纵切幼苗上胚轴顶端转化大豆的转基因方法,包括以下步骤:(a)浸泡大豆,光照保湿条件下培养至下胚轴长2~3cm;(b)将含有目的基因的农杆菌用渗透培养基悬浮,所述渗透培养基含有细胞分裂素KT、植物生长素2,4‑D、抗氧化剂DTT和L‑Cysteine;(c)在渗透培养基中,用薄刀刃在大豆的上胚轴顶端纵切,制造伤口;(d)致伤处理后的大豆幼苗浸没在渗透培养基中培养;(e)农杆菌侵染后的大豆幼苗在吸水纸上吸干水分,种入土中。
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