[发明专利]一种评估PC12细胞的神经元样分化程度的装置及方法

摘要

一种评估PC12细胞的神经元样分化程度的装置，由探针跳跃模式扫描离子电导显微镜HPICM，以及膜片钳系统两个部分构成的装置；评估方法：得到适合于利用HPICM技术观测PC12细胞微形貌的玻璃微探针；利用HPICM技术对NGF诱导分化不同时间点的活体神经元样PC12细胞表面形貌进行扫描成像；利用HPICM系统自带的图像处理软件扫描成像进行分析；得到适合于利用膜片钳技术进行全细胞记录的玻璃微探针；利用膜片钳技术在生理条件下记录活体神经元样PC12细胞的离子通道电流；利用PC12细胞的离子通道电流计算出其对应的内向电流和电流密度。优越性：利用HPICM技术与膜片钳技术相结合的手段可操作性强，能更加准确的从结构和功能两方面来定性定量的综合分析评估PC12细胞的神经元样分化程度。

主权项

一种评估PC12细胞的神经元样分化程度的装置，其特征在于它是由在生理液态培养条件下非接触式、高分辨率对活体生物样品表面微结构进行探测的探针跳跃模式扫描离子电导显微镜HPICM，以及从功能上对经NGF诱导向神经元分化的PC12细胞电兴奋性进行评估的膜片钳系统两个部分构成的装置；所述一种评估PC12细胞的神经元样分化程度的装置包括充满电解液的玻璃微探针、置于玻璃微探针内浸于电解液中的Ag/AgCl电极、参比Ag/AgCl电极、内含细胞与细胞培养液的培养皿、HPICM扫描控制系统、Z向HPICM扫描探头、XY向HPICM扫描台、膜片钳放大器、数模/模数转换器及计算机控制系统；所述充满电解液的玻璃微探针的尖端和参比Ag/AgCl电极均置于培养皿的细胞培养液中；所述充满电解液的玻璃微探针装于Z向HPICM扫描探头上；所述置于玻璃微探针内浸于电解液中的Ag/AgCl电极分别与膜片钳放大器和HPICM扫描控制系统连接；所述参比Ag/AgCl电极与膜片钳放大器连接；所述数模/模数转换器分别于与膜片钳放大器和计算机控制系统连接；所述Z向HPICM扫描探头、XY向HPICM扫描台分别与HPICM扫描控制系统连接；所述HPICM扫描控制系统与计算机控制系统连接。